桑色素-Ce(Ⅳ)体系共振光散射法选择性测定小牛胸腺DNA.pdfVIP

第26卷，第9期 光谱学与光谱分析 2OO and 6年9月 SpectroscopySpectralAnalysis september，2006 桑色素一Ce(Ⅳ)体系共振光散射法选择性测定小牛胸腺DNA ， 周 敏，马永钧，张德懿，陈 慧” 西北师范大学化学化工学院，甘肃兰州 730070 摘要研究了桑色素与Ce(Ⅳ)反应形成的络合物与DNA作用的共振光散射(RLS)特征，发现小牛胸腺 DNA(ctDNA)或鲱鱼精DNA(hsDNA)的加入都能使桑色素一Ce(Ⅳ)体系在320m处的共振光散射峰增强。 在最优条件下，ItLS强度与ctDNA的浓度在O～25 pg·mL叫范围内呈良好的线性关系，检出限为o．3肛g 大大低于同浓度的c①NA，因此可用于hsDNA存在下对ctDNA的选择性测定。将该法用于4种合成样的 测定，回收率在93．7％～108．4％之间。 主题词桑色素；DNA；共振光散射 中图分类号：0657．3文献标识码：A 文章编号：1000—0593(2006J09—1656一04 引言 1实验部分 L DNA是特殊的生命物质，DNA测定对于诠释其结构与l仪器与试剂 功能有重要意义。Pastemack等[1]曾用普通荧光分光光度计 所建立的共振光散射技术(RLs)在生物大分子的识别上有丰可见分光光度计(日本日立公司)。 富而灵敏的信号，用以表征了分子聚集的光谱特征。自此， 共振光散射技术开始被广泛应用于生化领域，成为继光度法 ×10“m01．L-1 和荧光法后又一简单灵敏的分析方法。近年来，RIS作为一 NaCl溶液中，准确浓度由260nrn处吸光 种新兴的分析方法，因其灵敏度高且方法简便，用于测定 度值确定；桑色素(2．o×10-7m01．L～，50％丙酮溶液)； mo卜L～，0．2m01．L-1 DNA已引起人们的广泛关注[纠]。该法不仅可用于DNA定Ce(S04)z溶液(1．O×10-6 H2S04 量，还可用于研究DNA与有机染料之间的键合作用。然而， 介质)；硫酸溶液(o．2m01．L叫)。所用试剂均为分析纯，水 这类方法由于在测定过程中使用仪器的同一灵敏度条件，因 为二次去离子水。 此对不同DNA的测定缺乏选择性。 1．2实验方法 桑色素(3，5，7，2’，4L五羟基黄酮)是黄酮类化合物，作 在25 mL比色管中依次加入1．OmL桑色素溶液和1．o 为荧光试剂常被用于测定各种有色金属[5]和稀有金属[引。利mL ce(Ⅳ)溶液，旋涡混合，放置10IIlin后加入适量DNA 用桑色素的金属络合物与DNA的相互作用对DNA进行荧 溶液，用二次去离子水稀释至10mL刻度并再次摇匀。将溶 光检测的方法已有少量报道[7’8]，但相关的RLS研究却尚未 液置于A。=A。，处进行同步扫描，可得共振光散射光谱，同 见文献报道。我们研究发现，DNA能增强桑色素与Ce(Ⅳ)时作试剂空白，于特征波长A=320啪测定m§强度值。发 反应形成的二元络合物所产生的共振光散射强度，据此本文 m。