维生素D临床知识与产品培训试卷.ppt

定义与原理 ELISA又叫酶联反应，是一种免疫测定 。基础:抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，间接地放大了免疫反应的结果，使测定方法达到很高的敏感度。 ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。 （1）酶联反应简介 在这种测定方法中有三个必要的试剂： 1、固相的抗原或抗体（免疫吸附剂） 2、酶标记的抗原或抗体（标记物） 3、酶作用的底物（显示计） 可设计出各种不同类型的检测方法 ELISA检测法必要试剂 （1）酶联反应简介 常用ELISA类型 夹心法 竞争法 双抗体夹心法 双抗原夹心法 BH100检测原理为：双抗体夹心法 25-OH-维生素D3检测：竞争法 （1）酶联反应简介 竞争法：是利用待测抗原和酶标抗原与特异性抗体竞争结合，或待测抗体和酶标抗体与特异性抗原竞争结合而进行测定的一种方法 竞争法示意图 （2）维生素D3检测中竞争法应用原理 25-OH-VD3试剂盒（酶联免疫法-竞争法），定量测定人体血清中的25羟基维生素D3，校准品、质控品、样品均被样品稀释液稀释，稀释后的样品和辣根标记的25羟基维生素D3抗原在包被了鼠单克隆抗体的微孔中温育1小时后洗版，然后利用TMB显色。