20150720昆虫细胞sf9.docVIP

Spodoptera frugiperda（草地夜蛾）卵巢细胞 形态：上皮细胞 生长特性：贴壁 注释：Sf-9细胞是由G.E. Smith 和 C.L. Cherry 在1983年从细胞株IPLB-SF 21 AE得来的一个克隆。IPLB-SF 21 AE是1977年由Vaughn等从草地夜蛾蛹的卵巢组织得到的。 培养液：TNM-FH培养液：照厂家的说明配好Graces Antheraea 培养液，每升培养液加3.3g酵母粉和3.3g乳白蛋白水解物，用1M KOH调pH到6.2-6.4过滤除菌，4℃保存。完整培养液在使用前加入10%热灭活的胎牛血清。 传代：用吸液管吹洗细胞使其悬浮，或用手从侧面拍打细胞培养瓶(当用大细胞培养瓶时)重悬细胞。 杆状病毒表达系统(baculovirus expression system)是近年来应用较多的真核表达系统，它可以在昆虫细胞中表达多种外源基因，包括真菌，植物，细菌，病毒的基因。杆状病毒是一类以昆虫细胞为天然宿主的双链DNA病毒，具有高度的种属特异性，不感染脊椎动物，对人、畜无害。目前研究较多的是苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒 (AcNPV) ，其宿主是草地贪夜蛾。而sf9细胞，正是杆状病毒表达系统的宿主细胞之一。sf9细胞属于半贴壁型细胞系，可以进行悬浮培养，也可以进行贴壁培养，在应用于蛋白的表达与制备纯化中，有着许多的优点。 杆状病毒表达