JAK-STAT信号通路在痛风性关节炎发病中的作用及铁锁痛风汤对其防治的研究.pdfVIP

贵阳医学院 2013 届硕士研究生论文 JAK-STAT 信号通路在痛风性关节炎发 病中的作用及铁锁痛风汤对其防治的研究 专业：肾病风湿 研究生：陈曾凤 导师：李龙教授 摘 要 目的：1. 探讨酪氨酸激酶-信号传导及转录激活因子（JAK-STAT）信号通路与 痛风性关节炎发病机制的关系 2.采用贵州苗药方剂（铁锁痛风汤），明确其对 痛风性关节炎的治疗作用，筛选对痛风性关节炎治疗的有效方剂。 方法：取50 只SD 雄性大鼠，将其随机分为5 个组， 10 只为1 组，分别设定为 正常组(K)，模型组（M），秋水仙碱组（Q），低剂量苗药治疗组（D），高剂量苗 药治疗组（G）。除正常组外，各组均采用尿酸钠（MSU）溶液（浓度为20mg/ml）， 每只 50ul，注射至大鼠右后肢踝关节腔内，以对侧鼓起为标准，制造急性痛风 性关节炎模型，正常组取等量生理盐水。分别于造模前1 小时，以及造模后1、 4、12、24、48 小时测定各组大鼠踝关节周径，计算关节肿胀指数。于造模之前 3 天开始灌胃，模型组和正常组给予3ml 生理盐水，其余各组相应给予低剂量苗 药、高剂量苗药、秋水仙碱，连续灌胃5 天(每天2 次)，第5 天第二次灌胃2 小 时后，处死大鼠，取其右侧后肢踝关节组织，行HE 染色观察各组大鼠右后支踝 关节软骨的病理变化，以及行免疫组化法和Real-time PCR 检测JAK2 的表达。 结果：1.模型组大鼠关节的肿胀指数要明显高于其他各组。HE 染色可见模型组 关节软骨和周围软组织炎症细胞浸润程度及肿胀程度均明显高于其他组。药物组 （包括低剂量苗药组、高剂量苗药组及秋水仙碱组）炎症反应较模型组明显改善。 2. Real-time PCR 结果表明：模型组JAK2 mRNA 表达量较正常组高,高剂量苗药 组与秋水仙碱组同模型组比较，其表达是明显下调的（P0.05）。高剂量苗药组、 秋水仙碱组同低剂量苗药组比较，表达量减少，具有统计学意义 (P0.05)。3. 免疫组化结果:模型组JAK2 阳性指标数高于对照组。 药物组（包括高剂量苗药 组、低剂量苗药组、秋水仙碱组、）的 JAK2 阳性标记指数均明显低于模型组 （P0.05），高剂量苗药组与秋水仙碱组之间差异无统计学意义(P0.05)。 结论：1. JAK2参与了痛风性关节炎的发病机制，可能与JAK2-STAT3信号通 路的激活有关，可进一步行STAT3在痛风性关节炎中的表达变化明确！2.铁锁痛 风汤可以减轻痛风性关节炎模型中，大鼠的关节肿胀程度，以及关节软骨、软组 2 贵阳医学院 2013 届硕士研究生论文 织的炎症程度，可以下调JAK-STAT炎症信号通路中的JAK2表达量，说明本方剂可 以抑制模型大鼠急性痛风关节炎症的发作，且可能与下调JAK2的表达有关。 关键词：JAK2； 秋水仙碱； 急性痛风性关节炎； 铁锁痛风汤 3 贵阳医学院 2013 届硕士研究生论文 英文缩略语表 英文缩写 英文全文 中文译名 JAK Janus Kinase 酪氨酸激酶 STAT Signal transducers and activators of 信号传导及转录激 transcription 活因子 TP RT-qPCR Real-time fluorescence quantitative pol 实时荧光定量聚合