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贵阳医学院 2014 届硕士研究生论文 JAK/STAT3 信号系统通过Leptin 调控hTERT 在肝癌细胞中的作用 专 业：外科学 研究生：高培亮 导 师：李海洋 教授 摘要： 目的探讨人肝癌细胞（HepG2）中 leptin介导JAK/STAT3 信号系统对端粒酶逆 转录酶(hTERT)的影响，试图解析在肝癌细胞中瘦素诱导端粒酶反转录酶(hTERT) 表达的分子机制。方法 1、采用Western 印迹法测定HepG2 细胞中瘦素受体的表 达情况；2、Western 印迹检测Tyrphostin AG490(JAK 抑制剂)处理HepG2 细胞 后hTERT 蛋白的表达情况；3、用STAT3-SiRNA 转染HepG2 细胞，用MTT 法检测 细胞增殖情况、RT-PCR 检测hTERT mRNA 的表达、Western 印迹检测hTERT 蛋白 的表达变化。结果 1、HepG2 细胞中存在瘦素受体的表达；2、 Western 印迹结 果显示在 AG490 处理组及 AG490 联合瘦素处理组的蛋白表达较瘦素诱导 hTERT 蛋白表达量减少；3、STAT3-SiRNA 转染HepG2 细胞后，细胞增殖能力降低；4、 在HepG2 细胞中干扰STAT3 片段，瘦素诱导的hTERT mRNA 和蛋白的表达量减少。 结论 1、在人肝癌细胞HepG2 中存在瘦素受体表达；2、在肝癌HepG2 细胞中， 瘦素诱导JAK-STATS 信号通路是上调hTERT 表达的可能机制。 关键词：瘦素；瘦素受体；肝癌细胞，HepG2；AG490；端粒酶逆转录酶 前言 JAK/STAT3 信号系统通过 Leptin 调控 hTERT 在肝癌细胞中的作用 3 贵阳医学院 2014 届硕士研究生论文 原发性肝癌（hepatocellular carcinoma HCC）是一种发病率高、治疗困难 [1] 的、死亡率较高的恶性病变肿瘤 。在我国所有恶性肿瘤中肝癌的死亡率居第二 位，我国肝癌死亡人数占全世界肝癌年死亡总数的 53％[2-3] 。而乙型病毒性肝炎 和丙型病毒性肝炎感染、酒精性中毒、黄曲霉毒素 B1 为其主要的危险性因素， 同时流行病学研究也发现肥胖与肝癌的关系密切。而在肥胖的患者中往往常伴有 糖尿病、高血压病、高脂血症等多种疾病，被称为多发性代谢综合征 (multiple [4] metabolic syndrome, MS) 。这些疾病的发生严重的威胁着我们人类的身心健 [5] 康，所以我们需要掌握它的发病规律并予以控制 。然而相关研究也已证实肥胖 与多种肿瘤疾病的发生发展关系密切，如乳腺癌、结肠癌、食管癌等，所以在今 后的相关研究中肥胖可能会成为某些肿瘤性疾病的独立性危险因素。 然而研究表明在肥胖患者中，肥胖 (ob)基因的蛋白产物：瘦素 (leptin)是一 种脂肪组织源激素。瘦素在外周血循环中的浓度对了解其生理效应及其对肥胖的 作用具有非常重要的意义。研究发现瘦素不仅具有调节人体代谢的功能，同时还 具有调节机体免疫功能、增加细胞侵袭性、促进血管形成和促进细胞增殖分化等 作用，而这是肿瘤发生发展的必备条件。研究显示在人正常的肝细胞和肝癌细胞 [6] 中都可检测到瘦素受体（ob-R）表达，且其表达差异有统计学意义 。 相关研究发现人肝癌的发生、发展是一种多基因参与的，通过不同基因在不 [7] 同时相的差异表达中进行调控的复杂过程 。然而瘦素在表达过程中可能会有多 条信号转导途径参与：如JAK/STAT3 信号通路、Ras 途径、MAPK 途径等其他脂类