缺血后处理兔心肌蛋白质组学双向凝胶电泳分析的初步研究 - 生物通.pdf

中国生物工程杂志　ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１０，３０（７）：７５７９ ? 檪檪檪檪檪檪檪檪殏 檪 殏 殏檪檪 研究简报殏檪 檪檪檪檪檪檪檪檪 缺血后处理兔心肌蛋白质组学双向 凝胶电泳分析的初步研究  李利文　周建美 　邹定全　冉　珂　李　李　徐军美 （中南大学湘雅二医院　长沙　４１００１１） 摘要　目的：研究缺血后处理对缺血再灌注心肌保护的相关蛋白的变化。方法：将６只新西兰大 白兔随机分为两组（每组３只）：心肌缺血再灌注对照组（Ｉ／Ｒ组）和缺血后处理组（Ｐ组）。两组 均接受左冠状动脉前降支阻断３０ｍｉｎ，开放再灌注１８０ｍｉｎ。缺血后处理组，结扎ＬＡＤ３０ｍｉｎ，然 后灌注３０ｓ，阻断３０ｓ，重复４次，继而再灌注直至１８０ｍｉｎ，分别取各组缺血区心肌进行二维凝胶电 泳，利用ＩｍａｇｅＭａｓｔｅｒ２Ｄ软件分析实验结果。结果：Ｐ组和Ｉ／Ｒ组对比，有１１个蛋白表达发生了 显著变化，其中表达增强的有７个蛋白，表达降低的有４个蛋白。结论：这些差异表达的蛋白可能 在缺血后处理对心肌缺血再灌注损伤的保护中发挥了作用。 关键词　缺血后处理　心肌　蛋白质组　双向凝胶电泳 中图分类号　Ｑ８１６ 　　心脏缺血再灌注（ｉｓｃｈｅｍｉａ／ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ．Ｉ／Ｒ）损伤 发物质、中介物质和效应子，而离子通道和效应蛋白是 严重影响缺血后心脏功能的恢复，甚至危及生命。有 各种细胞信号转导通路及信号级联反应的“终末效应 效地防治心肌 ［３］ Ｉ／Ｒ损伤是心脏手术成功的关键所在， 子” ，其中阿片受体、蛋白激酶Ｃ、细胞内外的信号传 亦是非心脏手术病人和非手术缺血性心脏病人预防心 导通路以及蛋白质的合成至关重要。特别是蛋白质的 脏意外缺血缺氧损伤的主要措施之一。１９８６年由 变化与缺血后处理的保护作用有密切的关系，发现和 ［１］］ 识别缺血后处理的保护作用中增加的保护蛋白有助于 Ｍｕｒｒｙ等 首先提出的心肌缺血预处理（ｉｓｃｈｅｍｉｃ ｐｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇ，ＩＰＣ），能减少心肌梗死面积和再灌注心 更好地了解缺血后处理的病理生理，并在临床上用药 律失常等的发生，起到心肌保护作用。由于这种预处 物和基因手段模拟这些变化，以获得与后处理保护效 理需在缺血前实施，而在临床实际工作中很难预测急 应类似的心肌保护。因此，本研究拟用２ＤＥ来探讨缺 性缺血事件的发生，因此ＩＰＣ在临床应用受到限制。 血后处理抗心肌缺血再灌注损伤的心肌有关蛋白表达 ［２］ 的变化，为缺血后处理的心肌保护作用的机制研究提 　　最近，Ｚｈａｏ等 报道了另外一种内源性心脏保护 机制，即指一个长时间缺血后，在再灌注开始时，通过 供参考。 反复短暂间断的缺血／再灌注而诱导的心肌保护现象。 １　材料与方法 并将此现象称为“缺血后处理（ｐｏｓｔｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇ），而且 缺血后处理可以在缺血后实施，故较缺血预处理具有 １．１　动物与试剂 更大的临床应用价值。其机制十分复杂，主要涉及触 　　健康雌性新西兰大白兔６只，体重１．５～２．５ｋｇ，由 中南大学湘雅医学院动物部提供。固相 ｐＨ梯度干胶 收稿日期：２０１００２０８　　修回日期：２０１００５１３ 长沙市科技局（Ｋ０７０７３８－３１）资助项目 条（ＴＰＧｓｔｒｉｐｐＨ３～１０ＮＬ，