气相色谱法分离条件的选择.ppt

第四节 分离条件的选择 2.分离方程式 反映分离度与柱效(n),分配系数比(α)及容量因子(k)的关系式。 K、n、α对色谱峰的影响 增加k,分离度增加，峰明显变宽； 增加 n,峰变窄，但改善分离度； 增加α，增加分离度，峰宽度不变。 二、实验条件的选择 在气相色谱中，固定液、柱温及载气的选择是分离条件选择的3个主要方面。用于提高柱效，降低板高，提高相邻组分的分离度。在进行定量分析时，要求组分能分离完全(R≥1.5)，才能获得较好的精密度和准确度。 1.从分离方程式选择实验条件： （一）提高αα决定于试样中各组分本身的性质，以及固定相和流动相。 α越大，固定液的选择性越好，R越大。 α=1，R=0，两组分不可能分离。 提高α的方法： 1）改变固定相和流动相的组成和性质； 2）降低柱温 (二)提高k: k大，R大。 k与固定液的用量和分配系数有关，并受柱温的影响。 增加固定液的用量，可增大R ，但会延长分析时间，引起色谱峰展宽。 提高k的措施： 通过改变柱温和流动相组成，将k值控制为2～10。 (三)提高n 2.载气及其流速的选择 范氏方程： H=A+ B/u + Cu a. 范氏方程： H=A+ B/u + Cu b. 3.柱温的选择 柱温是一个重要参数，直接影响分离效能和分析速度。 柱温升高的影响： 1）提高分析速度，缩短分析时间； 2）使气液传质速率加快，可降低塔板高度，改善柱效。 3）高于固定液“最高使用温度”，会造成柱流失。 4)加剧纵向扩散，降低柱效。 3、柱温的选择 选择柱温的原则： 在使难分离的物质得到良好的分离、分析时间适宜、并且峰形不拖尾的前提下，尽可能采用低柱温。 对于宽沸程的混合物，采取程序升温 通常根据试样的沸点选择柱温、固定液用量及载体的种类。 表 根据试样沸点选择柱温等条件 程序升温：指按预先设定的加热速度对色谱柱分期加热以使混合物中所有的组分均能在最佳温度下获得良好的分离。 程序升温可以是线性的，也可以是非线性的。 例: 程序升温与恒定柱温分离沸程为225℃的烷烃与卤代烃9个组分的混合物的差别。 图a,恒定柱温Tc=45℃, 图b,恒定柱温，但Tc=120℃ 图c：为程序升温。 4、柱长和内径的选择 分离度正比于柱长的平方根，即 所以增加柱长对分离有利。但增加柱长会使各组分的保留时间增加，延长分析时间。因此，在满足一定分离度的条件下，应尽可能使用较短的柱子。填充柱柱长2～4m. 3、柱长和内径的选择 增加色谱柱的内径，可以增加分离的样品量，但纵向扩散路径的增加，会使柱效降低。柱内径4～6mm. 4、进样时间和进样量 进样时间：进样速度必须很快，因为当进样时间太长时，试样原始宽度将变大，色谱峰半峰宽随之变宽，有时甚至使峰变形。一般地，进样时间应在1s以内。 进样量 进样量： 每根柱子，都有最大允许进样量。 进样量过大，会造成色谱柱超负荷，柱效下降，峰形变宽，保留时间改变。 最大允许进样量，应控制在使峰面积和峰高与进样量呈线性关系的范围内，液体试样一般进样0.1～0.2μl。 五、其它条件 气化室温度： 气化室温度应等于或稍高于样品的沸点，以保证迅速气化。通常高于柱温30～50℃，否则色谱峰展宽，峰高下降。 汽化室温度过高，会导致样品分解 检测器温度： 高于柱温30-50℃或等于气化室温度 TCD：高于柱温，温度升高灵敏度下降，温度应稳定 FID：100℃以上，对温度要求不高 ECD：温度对基流和峰高影响很大，但应具体样品具体分析 三、样品预处理 对于一些挥发性或热稳定性很差的物质，需进行预处理，才能用于分离分析。 1.分解法 2.衍生化法：酯化法，硅烷化法 第五节 毛细管气相色谱法 一、毛细管气相色谱法的特点和分类 (一)毛细管气相色谱法的特点 1.分离效能高。 2.柱渗透性好（载气流动阻力小） 3.柱容量小，允许进样量小。一般采用分流进样技术和柱后尾吹。 4.易实现气相色谱-质谱联用。 5.总柱效高。 6.应用范围广。 (二)毛细管柱的分类 毛细管柱的内径一般小于1mm,可分为开管型和填充型；常规、小内径、大内径毛细管柱等。 1.填充型毛细管柱 填充毛细管柱：先在玻璃管内松散地 装入载体，拉成毛细管再涂固定液。 微型填充柱:柱径细,载体颗粒细到几 十到几百微米。 2.开管型毛细管柱 按内壁的状态分： (1)涂壁毛细管柱(wall coated open tubular column,WCOT):固定液涂在毛细管内壁上。 (2)多孔层毛细管柱(porous-layer open tubular column,PLOT):在毛