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腐竹生产过程中豆浆游离氨基酸的HPLC法测定。 陈悦娇，自卫东，黄桂颖，马应丹，张海燕 (仲恺农业技术学院轻工食品学院，广东广州，510225) 摘 要 建立一种测定豆浆中游离氨基酸的反相高效液相色谱法。优化条件为：EclipseXDB—C-s反相柱 90％，流速：1．0mL／min，检测波长：338nm。在此条件下得到各游离氨基酸的直线回归方程，相关系数都在 0．9900以上。豆浆煮制过程中游离氨基酸含量逐步增加，回收率在90．86％～106．05％之问。 关键词HPLC，豆浆，游离氨基酸，测定 腐竹是以大豆为原料，经破碎、磨浆，加水稀释 后，用机械或者人工的方法使浆、渣分离，取其浆，再 衍生剂的配制：精密称取邻苯二甲醛50mg于 将豆浆煮沸、揭皮、烘干制作而成。腐竹的营养成分 10mL容量瓶，加1mL甲醇溶解，加入100／tLB一巯基 与大豆相似，其中含有丰富的蛋白质和人体必需的各 种氨基酸，营养价值高，因此它是一种良好的植物蛋 调pH9．5)定容，混匀，置于暗处每隔1d补10弘L巯 白质食品。为研究腐竹生产过程中豆浆中游离氨基 基乙醇，每周需重新配制。 酸的变化，需建立一种测定适合本类样品的游离氨基 氨基酸标准液的配制：精密称取18种氨基酸 酸测定方法。测定氨基酸的经典方法为柱后衍生，氨 基酸自动分析仪法，但该法设备昂贵，专属性强。随 7．5的磷酸盐缓 着研究工作的深入，柱前衍生结合HPLC法已成为20mg于100mL的容量瓶中，用pH 氨基酸分离和分析的重要手段[1-4]。本文探讨采用冲液充分溶解，并定容至刻度，得浓度为0．2mg／mL 1100高效液相色谱的氨基酸混标溶液。 邻苯二甲醛衍生法，利用Agilent 仪建立一种适于测定豆浆中游离氨基酸分离分析的 1．2方法 方法，以期为腐竹生产的研究工作提供分析测试。 1．2．1豆浆煮制工艺 原料(黄豆)一选料除杂一清洗一浸泡(加黄 1材料与方法 豆干重4倍水，浸泡6h)一磨浆(加黄豆干重14倍 1．1 材 料 水)一过滤一煮浆一取样 黄豆(市售)。 为了研究豆浆在煮制过程中的游离氨基酸变化， 本试验参考腐竹的生产工艺，每小时起膜4次，即每 Agilent1100高效液相色谱仪，美国安捷伦科技 15rain起膜1次，直至豆浆混浊不再取样。并在每次 公司；SHZ一Ⅲ型循环水真空泵，上海亚荣生化仪器 起膜以后取出1个豆浆样品经过样品处理后，用 厂；KQ5200超声波清洗器，昆山市超声波仪器有限 HPLC进样处理分析其中氨基酸的变化情况。本试 公司；SZ一93自动双重纯水蒸馏器，上海亚荣生化仪 验从原豆浆沸腾5min后开始取样，然后按每隔15 器厂；PHB一4型便携式数字PH计，上海精密科学 min等时间取样1次，得7个豆浆样品。 仪器有限公司。 1．2．2样品处理 甲醇，色谱纯；乙醇，硼酸，醋酸钠，NaOH， 准确移取豆浆样品10mL于小烧杯中，加入等 H。KPO。，邻苯二甲醛，B一巯基乙醇，