荧光探针法研究铜离子-姜黄素体系中1O2的反应机理及在O#183;-2存在下1O2的测定.pdfVIP

V01．30 高等学校化学学报 No．3 CHINESEUNIVERSITIES 460～464 2009年3月 CHEMICALJOURNALOF 荧光探针法研究铜离子．姜黄素体系中102的 02的测定 反应机理及在O三一存在下l 吕庆銮，张苗，岳宁宁，宫斌，王怀友 (山东师范大学化学化工与材料科学学院，济南250014) CUR)在铜离子催化下产生的单线态氧(10：)，其反应机理为姜黄素与溶液中的氧分子快速作用产生Oj一和 H：O：等活性氧物种，同时cu2+与姜黄素形成复合物，再与H：02形成过氧化物过渡态，过氧化物进一步与 关键词 1，3-二苯基异苯并呋喃；姜黄素；单线态氧；荧光猝灭 中图分类号0657．39 文献标识码A 文章编号0251-0790(2009)03-0460-05 姜黄素是由姜科姜黄属植物姜黄(Curcuma longa)中提取的一种酸性酚类物质，常用作食品天然色 素、调味品、香料及防腐剂．近年来的研究表明，姜黄素具有多种生物活性作用，如抗氧化、消炎、抗 病毒、促进消化、提高免疫力、降血脂和对关节、肝及肾脏的保护等作用¨。1． 金属离子．姜黄素复合物也表现出了一些积极的生物活性，如对DNA氧化损伤的保护作用和对 J．氧化一抗 化产生活性氧自由基，造成蛋白质、脂质和DNA的氧化损伤，表现出了助氧化性和毒性捧’9 氧化之间的平衡是维持机体稳态的重要机制之一，活性氧是该机制发挥作用的中心物质，过量活性氧 引起的氧化损伤被认为与许多人类疾病如癌症、神经退行性病变和衰老等有关uo|．据文献[9]报道， 姜黄素在Cu2+催化下造成DNA的氧化损伤和断裂的原因，是由反应过程中产生的各种活性氧(其中 包括‘O：)所致．在生物体系中，10：是重要的活性氧物种，它一方面具有较强的毒性，造成机体的损 伤。1112】，另一方面又是生物体免疫系统的主要杀菌剂，还可用于痛症的光动力疗法一3|．对于姜黄素的 使用安全性一直存在争议H4’”1．因此，研究姜黄素体系中单线态氧的生成机理，建立简捷的测定方 法，以期对姜黄素的安全性做出评价具有十分重要的意义． 目前单线态氧的测定方法主要有电子自旋共振法、磷光光度法、分光光度法、化学发光法和荧光 法等¨n驯．单线态氧的测定遇到的问题主要是灵敏度低、干扰严重、操作程序复杂且检测条件要求苛 刻’2卜23 O 2．一存在下10：的测定． 1 实验部分 1．1仪器与试剂 型酸度计(上海雷磁仪器厂)． 收稿日期：2008．10-09． 基金项目：山东省自然科学基金(批准号：Y2006831)资助． 联系人简介：王怀友，男，教授，主要从事光分析化学研究．E．mail：wanghuaiyou@sdnu．edu．cn No．3 吕庆銮等：荧光探针法研究铜离子．姜黄素体系……及在0；一存在下102的测定 氯化铜：0．02 moL／L，现用现配；双氧水：0．3％(体积分数)，现用现配；次氯酸钠：临用前用硫代 硫酸钠标准溶液标定；超氧化物歧化酶(Superoxide U／ragProtein)；过氧化氢酶(Catalase，CAT，Sigma公司，取自牛肝，2000～5000U／mgProtein)；1，3-二 苯基异苯并呋喃(DPBF)乙醇储备液(Alfa 内稳定；9，10-二苯基蒽(9，10一Diphenylanthracene，DPA)四氢呋喃溶液(Alfa mol／L L)；姜黄素(CUR)储备液(上海试剂三厂，1．000×10’3mol／L)；0．1 Tris．HCI缓冲液：pH= 7．4．所有试剂均为分析纯；实验用水为超纯水(电阻率≥18．2MQ·cm)． 1．2实验步骤