自然杀伤细胞参与脑缺血后损伤的作用机制.pdfVIP

圈匠筮瘗堂苤查；Q!j生!旦筮!!鲞筮!塑!堕』!堡堡!!!!：丛!!：!Q!i：∑!!：!!：盟!：! ·基础研究· 自然杀伤细胞参与脑缺血后损伤的作用机制 孟庆峰李春国 王广友 王丹丹 张彤帅 王双双 张浩强 李呼伦张瑶 【摘要】 目的探讨自然杀伤细胞(NK)参与脑缺血后损伤的作用机制。方法①体内实验：免疫 荧光检测永久性大脑中动脉栓塞(pMCAO)小鼠模型脑组织中NK细胞浸润情况以及干扰素(IFN)一1表达 情况；流式细胞术检测pMCAO小鼠模型脑中NK细胞浸润数目和IFN一^y表达；腹腔注射NK细胞中和抗 h脑内NK细胞浸润情况。②体外实验：建立体外血脑屏障并加入NK 体，流式细胞术检测pMCAO小鼠12 细胞和荧光标识的牛血清白蛋白(BSA—FITC)，氧糖剥夺(OGD)实验6h后荧光分光光度计检测血脑屏障 6 通透性；将NK细胞与小鼠神经细胞共培养，并加入IFN一1阻断剂，OGDh后流式细胞术检测神经细胞凋 亡。结果①体内实验示pMCAO小鼠脑中有NK细胞浸润和IFN一^y表达，与非缺血侧相比，缺血侧的NK 细胞浸润显著增多并于12h达到高峰(P㈨0．001)；脑缺血组织中浸润的NK细胞表达IFN一1与非缺血 侧相比增多(P12h0．001、P2。。0．01、P96h0．05)；清除体内NK细胞后，pMCAO小鼠脑内NK细胞浸润 显著减少(P0．001)，脑内IFN一1表达显著下降(P0．001)。②体外实验示OGD条件下，NK细胞组与 对照组相比，BSA-FITC渗透显著增多(P0．01)；NK细胞可促进神经细胞死亡(P0．01)。结论NK细 胞参与脑缺血损伤过程；NK细胞通分泌IFN一1加重血脑屏障破坏和神经细胞损伤。 【关键词】脑缺血；自然杀伤细胞；干扰素一吖 MechanismofNKcells inbrainischemia MENG participating injury Qingfeng+，LIChunguo，WANG Yao． +District Guangyou，WANGDandan，ZHANGTongshuai，WANG Hulun，ZHANG Shuangshuang，LI of YichunPublic Technical Bureau City Security Nancha，Yichun153100，China Squadron author：ZHANG Corresponding Yao，Email：aoudazhang@hotmail．con ToresearchthemechanismofNK inbrain 【Abstract】Objective ischemia．Methods participating in infihrationand in mousebrainwere vivo：NK IFN一1 detectedimmunofluores— (DExperiments pMCAO by infiltrationand in brainsweredetected cellsinfil— cence；NK expression IFN一1 pMCAO byflo