采用双峰驼重链抗体特异的抗血清检测不同抗原免疫骆驼过程中血清重链抗体的水平.pdfVIP

·68· 生物技术 中国畜牧兽医 2012年第39卷第4期 采用双峰驼重链抗体特异的抗血清检测不同 抗原免疫骆驼过程中血清重链抗体的水平 夏丽沽。苏幼红。晏鹏飞，刘丽。李江伟 (新疆大学生命科学与技术学院，新疆生物资源基因工程重点实验室，新疆乌鲁木齐 830046) 摘要：为了探究重链抗体在骆驼免疫保护中的生物学作用，本研究利用ProteinG和ProteinA亲和层析纯化新疆双峰驼 检浏双峰驼在体液免疫应答过程中针对spaA-N、溶菌酶和蒜氨酸酶3种抗原的重链抗体的滴度变化。结果从新疆双峰驼血 清中亲和层析纯化出天然重链抗体19G2．蛋白质分子质量约为46ku；免疫昆明小白鼠后获得抗双峰驼总lgG多抗血清的效 链抗体IgG2出现延迟反应。3种蛋白均能诱导抗原特异的lgG2亚类重链抗体的产生。 关键词：新疆双峰驼；重链抗体}IgG2；IgG2多抗血清 中围分类号：S852。5 文献标识码：A 文章编号：1671‘?236(2012)04-0068—05 脊椎动物免疫系统能够产生识别几乎任何外源 诱导骆驼产生抗原特异的重链抗体。羊驼感染致死 物质的特殊分子——抗体，其中IgG是血清中最主 性的病原体P口r8f口加05fro”g3Tzs抬玎”舀后，仅产生 要的抗体类型。经典的IgG抗体由两条相同的重 抗原特异的IgGl常规抗体的群体死亡率远远高于 链(H)和两条相同的轻链(L)组成。然而，在骆驼血那些能产生高滴度重链抗体的群体(Daley等， 2005)，说明重链抗体在这群动物免疫保护中起主导 清中不仅存在由两条H链和两条L链构成的IgGl 作用。重链抗体如何响应抗原的诱导及对于骆驼的 型常规抗体，还存在缺失轻链的IgG2和IgG3亚型 免疫保护产生何种作用值得研究。 的重链抗体(heavy-chainantibody，HcAb)(Ham— er}Casterman等，1993)。尽管重链抗体缺失轻链 6口cfr缸一 和cHl区，其可变区仍具有很好的特异识别和结合 其中分布在新疆地区的是双峰驼(C口mP2“s 抗原的能力，其与抗原结合的亲和力与常规抗体相 ，z扰5)。新疆野生双峰驼是目前世界上唯一存在的骆 当(Muyldermans等，2001)。 驼科骆驼属野生种，为了更好地保护和利用这一珍 稀物种，有必要对其抗病性能进行研究。前期试验 目前，已对HcAb的理化性质(Genst等，2006； 已经证实在新疆双峰驼血液中存在重链抗体，本试 Muyldermans等，1999)、抗原结合特性(Ghahroudi 验以新疆双峰驼为研究对象，一方面从骆驼血清中 等，1997)、靶向性(Stijlemans等，2004)和应用方面 纯化不同亚型的IgG，用于制备抗新疆双峰驼重链 (Sven等，2010)进行了较多的研究，但对这种缺少 轻链的特殊抗体类型在骆驼免疫反应中的确切作用 抗体不同亚型的多抗；另一方面利用制备的这些抗 77z口 体，采用ELIsA检测不同抗原免疫骆驼过程中血清 仍不清楚。对羊驼(Ldmn加fD5)和美洲驼(k 重链抗体的滴度变化，为揭示重链抗体在骆驼体液 gf口m口)的研究表明，抗原免疫或感染锥虫(Trypa- 免疫反应中的作用提供线索和研究基础。 nosomes)后