微生物的基本技术和应用灭菌平板划线法稀释涂布平板法倒平板.PPT

1.培养基对微生物的选择分析 2.微生物的分离与筛选 3.微生物在传统发酵技术中的应用 1．(2013·新课标全国卷Ⅰ)回答下列有关泡菜制作的问题： (1)制作泡菜时，所用盐水需煮沸，其目的是 。为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的作用是 。 (2)泡菜制作过程中，乳酸发酵的过程即为乳酸菌进行 的过程。该过程发生在乳酸菌细胞的 中。 (3)泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有 、 和 等。 (4)从开始制作到泡菜品质最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸。这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是 ，原因是 。 【解析】　结合泡菜制作过程的相关知识回答问题。 (1)制作泡菜时需要先形成无菌环境，所用盐水需煮沸，以杀灭盐水中的杂菌。想要缩短制作时间，应该缩短菌株的生长时间，陈泡菜液中含有一定量的乳酸菌，这样菌体数量扩增速度会加快。 (2)乳酸菌为厌氧菌，进行无氧呼吸产生乳酸，该过程只能在细胞质中进行。 (3)温度过高、腌制时间过短、食盐用量不足等，容易造成杂菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。 (4)从开始制作到泡菜品质最佳这段时间内，氧气浓度逐渐降低，泡菜液逐渐变酸，不适宜杂菌生长，而适宜乳酸菌生长，因此乳酸菌数量增加，其他杂菌数量减少。 【答案】　　(1)杀灭杂菌　增加乳酸菌数量　(2)无氧呼吸细胞质　(3)温度　腌制时间　食盐用量　(4)乳酸菌数量增多，杂菌数量减少　乳酸菌比杂菌更为耐酸 2．植物激素与组织培养 生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素，其作用及特点为 (1)在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈现加强的趋势。 (2)使用顺序不同，结果不同，具体如下 2．(2012·山东高考)辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如图。 (2)图中培养外植体的培养基中常用的凝固剂是 。培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值 (填“高”或“低”)时，有利于芽的分化。对培养基彻底灭菌时，应采用的灭菌方法是 。 (3)图中外植体的消毒所需酒精的体积分数是 。用酶解法将愈伤组织分离成单细胞时，常用的酶是 和纤维素酶。 (4)提取辣椒素过程中，萃取加热时需安装冷凝回流装置，其目的是 。 【解析】　(1)植物组织培养的关键过程包括脱分化和再分化，由形成的愈伤组织再分化成具有根和芽的试管苗。 (2)在组织培养过程中，需要无菌无毒条件、一定的营养条件、激素条件和适宜的环境条件等。生长素含量高于细胞分裂素时，愈伤组织先分化出芽；反之，则先分化出根。制作植物组织培养等培养基时，需向培养基中加入琼脂进行凝固，并采用高压蒸汽法进行灭菌。 (3)将愈伤组织分离成单个细胞时需要酶解植物细胞壁，植物细胞壁的成分为纤维素和果胶，故需用纤维素酶和果胶酶。对植物外植体进行消毒，消毒所用的酒精体积分数为70%。 (4)用萃取法提取植物有效成分时，应在瓶口安装冷凝回流装置，目的是防止加热时有机溶剂的挥发。 【答案】　　(1)脱分化(或去分化)　再分化 (2)琼脂　低　高压蒸汽灭菌 (3)70%　果胶酶 (4)防止有机溶剂挥发 1.DNA和蛋白质技术 (1)DNA的粗提取与鉴定 ①基本原理： Ⅰ.DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，在0.14 mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低。 Ⅱ.DNA不溶于酒精溶液。 Ⅲ.DNA不被蛋白酶水解。 Ⅳ.DNA与二苯胺发生蓝色反应。 ②主要步骤：选取材料→破碎细胞，获取含DNA的滤液→去除滤液中的杂质→DNA的析出与鉴定。 ③注意事项： Ⅰ.选择动物细胞时，细胞比较容易破碎，选择植物细胞时则要先溶解细胞膜(如加洗涤剂、研磨等)。 Ⅱ.以哺乳动物红细胞为材料时，需向血液中加入柠檬酸钠抗凝。 Ⅲ.二苯胺需现用现配。 (2)PCR反应的原理、过程及结果 ①PCR原理 在一定的缓冲溶液中通过控制温度并提供模板和原料，使DNA复制在体外反复进行。 ②PCR反应过程 Ⅰ.变性：当温度上升到90 ℃以上时，双链DNA解聚为单链，如下图： ③结果 a．PCR一般要经历三十多次循环，每次循环都要包括变性、复性、延伸三步。 b．两个引物之间的固定长度的DNA序列呈指数扩增。 (3)血红蛋白的提取和分离 ①方法及原理： 2．植物有效成分的提取 (1)植物芳香油三种提取方法的比较 【特别提醒】　 (1)三种提取方法的选用是由植物原料的特点决定的，三种方法的原理和操作过程不同，但都需