常见重要毒物的检验分解.ppt

样品检测：从检测卡袋中取出检测卡，在卡上做好样品编号标记；用吸管吸取平皿上全部待检样液，滴入加样孔中，加样后开始计时，5-10分钟内观察结果； 结果判断： 阴性:测试线(T)与对照线(C)都出现，表明样品中黄曲霉毒素的浓度小于5.0ug/kg 阳性:只有对照线(C),无测试线(T)，表明样品中黄曲霉毒素的浓度大于或等于5.0μg/kg。 无效:对照线(C)和测试线(T)都不出现，或者对照线（C）不出现。 农大以你为荣! * * * * 2、蒸气显色 把易挥发的某种试剂置于密闭的容器内（如标本缸、干燥器等），使其蒸汽充满整个容器，然后将已挥干展开剂的薄层板放入，使蒸汽与检样斑点作用面显色。常用的试剂有固体碘、液体溴、浓氨水等。显色后的薄层板应立即观察，否则置于空气中过久，斑点上的颜色会因挥发而褪去。 3、紫外光下显色 有些化合物本身能发荧光，挥去展开剂后的薄层板可置于紫外光灯下观察荧光斑点，并用针尖或铅笔等在斑点位置上划以标记，以免停止紫外光照射后荧光消失，无法确定斑点位置。有些化合物本身不发荧光，可用硅胶GF254板分离，在紫外光灯照射下整个板面显黄绿色荧光，斑点部分呈暗色。 （一）样品的采取及处理 1、样品的采取 有机磷农药中毒时，最适宜的检样：若经消化道引起的中毒，生前可取病畜的呕吐物，洗胃时第一次导出液，血液；有些有机磷农药（敌百虫、对硫磷、甲基对硫磷等）中毒时，还可取尿液；死后可取胃及胃内容物、血液、肝脏；此外还可取病畜吃剩的饲料或饮水。若经呼吸道引起的中毒，可取呼吸道分泌物、血液、肺脏及肝脏。若因污染了皮肤而引起中毒，可取被污染部位的皮肤及皮下组织、血液和肝脏。 二、有机磷农药的检验 2、提取与分离 有机磷农药绝大多数是脂溶性毒物，易溶解在有机溶剂中。但不同的有机磷农药的极性强弱不同，敌百虫、敌敌畏、乐果等属于极性强的有机磷；3911、1240等属于弱极性有机磷；而1605、1059等属于中等极性有机磷。提取时原则上极性强的有机磷，用强极性的有机溶剂提取。极性弱的有机磷用极性弱的有机溶剂提取。但由于检验前很难确定是哪种农药引起的中毒，所以通常用苯、氯仿、二氯甲烷，可将绝大多数有机磷农药提取出来。比较常用的是氯仿和苯。 有机磷农药在碱性溶液中易水解，有些有机磷农药具有挥发性，因此一般应在中性或弱酸性条件下提取。在浓缩时，温度不宜过高，应控制在60℃以下。根据检样的种类不同，农药的性质不同，常采用下述方法进行提取。 （1）固体检样的提取 取被检样50g于具塞三角瓶中。加氯仿或苯（40-30-20ml）浸泡，并不断振摇，1h后过滤，收滤液于蒸发皿中，残渣用氯仿或苯洗两次，合并洗液于蒸发皿中，在60℃以下水浴上蒸发近干，供检。 （2）半固体检样的提取 取被检样适量于蒸发皿中，加适量无水硫酸钠研磨脱水，移入具塞 三角瓶中，按固体检样的提取方法进行提取。 （3）液体检样的提取 若检样是水或尿液可取适量置于分液漏斗中，加氯仿或苯振摇提取，分出氯仿或苯于蒸发皿中，再重复提取1—2次，合并提取液，在水浴上蒸发近干，待检。 3、净化 被检样经有机溶剂提取并浓缩后，如果含杂质较少，可直接检验。若含杂质较多，则需进一步净化，净化一般用活性炭脱色就可以了。 （二）胆碱酯酶活性测定 [原理] 乙酰胆碱遇血液中胆碱酯酶分解为胆碱和乙酸，乙酸产生的多少，可引起PH值的改变，用溴麝香草酚蓝（BTB）作指示剂，在一定温度、一定时间内，观察颜色变化，推测酶的活力。 [试剂] 乙酰胆碱试纸制备。可取溴麝香草酚蓝0.14g，溴代乙酰胆碱0.23g，加无水乙醇20ml溶解，用0.4mol/L氢氧化钠溶液 调PH值为7.4—7.6（溶液应呈灰褐色），将质量好的定性滤纸浸入，2min后取出阴干，剪成1cm2的小片，贮于磨口棕色瓶中，于干燥处避光保存。 [操作] 取乙酰胆碱试纸两片置于载玻片两端，分别加被检病畜血和健康同种动物血（或健康马血）1滴，标记后，立即加盖另一载玻片，用橡皮筋扎紧，置37℃湿箱中或腋下保温20min后取出，观察纸片颜色变化。根据颜色变化估计酶的活性。 胆碱酯酶活性与胆碱酯酶试纸颜色变化 试纸颜色 酶的活性 中毒程度 红色 紫红色 深紫色 蓝色 80—100 60 40 20 正常 轻度 中度 重度 [说明] （1）采血及检验所用器具均应洗涤干净。并用PH6.8—7蒸馏水反复冲洗烘干备用。 （2）检验时，血滴不可过大，直径以0.6—0.8cm为宜。刚加血时二纸片均应呈蓝黑色，否则试纸失效。观察血斑时，要看试纸反面，以血斑中心颜色为准，最好成一斜角观察，不要直接对光。 （3）当酶活性在60%以下时，应复试一遍，以免误判。 （4）如无溴