血清一阶导数荧光光谱诊断早期恶性肿瘤.pdfVIP

第35卷 分析化学 (FENXI HUAXUE) 研究简报 第12期 2007年12月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 1795～1797 血清一阶导数荧光光谱诊断早期恶性肿瘤 张荣斌 周培琛 林国春 李耀群 (厦门大学化学化工学院与现代分析科学教育部重点实验室，厦门361005) (厦门大学物理与机电学院，厦门361005) 摘 要 利用Wistar大鼠接种恶性肉瘤模拟人患上癌症。取Wistar大鼠眼静脉血制备血清，并用乙醇简单 处理得上层清液，扫描获得其一阶导数荧光光谱，确定上层清液原卟啉发射带(630 nm附近)的峰高，观察到 健康Wistar大鼠与癌变大鼠的血清样存在明显差异，10例癌变样假阳性率为0，而20例正常样中仅有1例假 阳性达到了恶性肿瘤早期诊断的目的。 关键词 癌症，原卟啉，阶导数荧光光谱，血清 1 引 言 荧光分析法相对于其它光谱法有3个主要优势：高灵敏度、快速和破坏性小，近年来已广泛用于癌 症诊治领域。有研究表明，癌症患者卟啉代谢异常，其体内具有特征荧光光谱的原卟啉Ⅸ可以作为癌症 的分子标志物…。Profiol2j，Alfanol3j，Lohmannl4 以及Yang 等开展了在人类体内外和动物肿瘤自体 荧光的研究。可是利用这项技术通过血清或血浆来诊断癌症的研究并不多 …。孟继武等¨ 通过直 接扫描血清荧光并采用经验公式开展临床筛查，但由于内滤效应等因素的影响，血清直接扫描可能会使 光谱失真而导致假阴性的误诊。Masilamania等¨叫通过丙酮萃取红细胞中的原卟啉及锌原卟啉，扫描其 萃取液的荧光发射光谱，并用荧光强度比值( 。 ／15帅 )作为判别界限，效果较好。当恶性肿瘤导致临 床症状时，一般来说它就长到常规方法能确定的尺寸。但由于早期癌变并无特别的临床症状，常规方法 不足以诊断早期癌变¨…。因而有必要建立行之有效的新方法用于诊断早期癌变。 导数技术应用于荧光分析，在解决荧光测定中的背景干扰和谱带重叠问题上收到了良好效果，已被 证明是一种提高荧光分析选择性的有效手段 。本研究利用血清中能被乙醇萃取的卟啉类荧光团 的自身荧光光谱来辨别早期癌变，并结合导数技术，提高其确诊率。由于本方法能够在较早阶段对肿瘤 无影响的情况下检测到癌变，且不会使病人感到恐惧和痛楚，可见本方法颇有前景。 2 实验部分 2，1 仪器与试剂 实验室自制多功能荧光分光光度计_1 j，氙灯功率为150 W。激发、发射单色器狭缝宽度均为 5 nm，扫描速度为240 nm／min，PMT负高压=一702 V，灵敏档S=3，导数光谱采用电子微分获得。液池 的规格为1 cm×1 cm；ILl—TGL～16C型高速台式离心机(无锡市瑞江分析仪器有限公司)。 健康Vistar雄性大鼠30只，体重250～300 g，购自厦门大学抗癌中心动物实验室，随机分为6组， 4组为正常空白样，2组为接种瓦克癌一256的早期荷瘤大鼠样；无水乙醇，分析纯(国药化学试剂公司)。 2．2 实验方法 于大鼠眼眶处取血3．0 mL，装入离心管，2 h后，以3000 r／min离心10 min制得血清。取0．5 mL血 清于2．0 mL血清瓶，加入1．0 mL无水乙醇，盖上盖子震摇均匀，以3000 r／min离心10 min，取1．0 mL 上层清液注入石英样品池中。将装有样品的石英液池置于仪器的样品池架中，测绘其零阶和一阶导数 荧光光谱。导数光谱采用峰一峰测量法(一阶导数荧光光谱图629．2 llm处的最低峰与643．9 nm处最高 2007-05—14收稿；2007-08-06接受 本文系国家自然科学基金(No、国家重点基础研究发展计划(No．2007CB935601)及福建省自然科学基金(No．B0410002) {E—mail：yqlig@XIIlU．edu．cn 1796 分析化学 第35卷 峰的差值)定量原卟啉。 3 结果与讨论