犗糖基化在酪氨酸羟化酶功能调节中的作用.pdf

第 卷 第 期 武汉大学学报 （医学版） Ｖｏｌ．３５Ｎｏ．４ ３５ ４ 　 年 月 ， ２０１４ ７ ＭｅｄｉｃａｌＪｏｕｒｎａｌｏｆＷｕｈａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔ Ｊｕｌ２０１４ ｙ 糖基化在酪氨酸羟化酶功能调节中的作用 犗 丁 伟 谢 腾 张 捷 付 锴 赵时雨 黄 鑫 想 象 杨振宇 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 武汉大学中南医院神经外科 湖北 武汉 ４３００７１ 　 　 　 摘要 目的：观察酪氨酸羟化酶（ ） 糖基化和磷酸化水平在 羟多巴胺（ ）诱导的 细胞 ＴＨ Ｏ ６ ６ＯＨＤＡ ＳＨＳＹ５Ｙ 　 （人神经母细胞瘤细胞）帕金森病细胞模型中的变化，探讨 糖基化在酪氨酸羟化酶功能调节中的作用。方法：用 Ｏ 处理 细胞作为模型组；用相同终浓度的 加上四氧嘧啶（ ， 糖基化转移酶抑制 ６ＯＨＤＡ ＳＨＳＹ５Ｙ ６ＯＨＤＡ ＡＬＸ Ｏ 剂）处理 ＳＨＳＹ５Ｙ细胞作为模型治疗组；用 ＡＬＸ处理ＳＨＳＹ５Ｙ细胞作为治疗对照组。用Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹检测 ＳＨ 细胞 的表达以及其 糖基化和磷酸化水平的变化，采用 法检测各组细胞多巴胺的浓度。结果： ＳＹ５Ｙ ＴＨ Ｏ ＥＬＩＳＡ 浓度依赖性地引起 细胞存活率下降， ／ 处理细胞 ，细胞存活率 ６ＯＨＤＡ ＳＨ５ＹＳＹ １２．５５０．０ ｍｏｌＬ６ＯＨＤＡ ２４ｈ μ 为对照组的 ； ／ 处理细胞 后存活率低于 。 ／ 处理 ９６．９％７２．３％ １００ ｍｏｌＬ６ＯＨＤＡ ２４ｈ ５０％ ５０ ｍｏｌＬ６ＯＨＤＡ μ μ 细胞 引起细胞 表达的下降、糖基化水平升高和磷酸化水平下降； 处理 细胞 ＳＨＳＹ５Ｙ ２４ｈ ＴＨ ＡＬＸ ＳＨＳＹ５Ｙ ２４ｈ 后， 糖基化水平下降、磷酸化水平升高，但 的表达无改变，总的多巴胺的浓度升高了 （ ＴＨＯ ＴＨ １１．５％±３．４％ 犘＜ ）；用四氧嘧啶 ／ 处理 细胞 后，与模型组比较， 表达无明显改变， 糖 ０．０１ ＋５０ ｍｏｌＬ６ＯＨＤＡ ＳＨＳＹ５Ｙ ２４ｈ ＴＨ Ｏ