玉米赤霉烯酮快速间接竞争酶联免疫检测技术研究及应用-上海农业学报.pdf

上海农业学报　２０１５，３１（１）：９２－９５ ＡｃｔａＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｅＳｈａｎｇｈａｉ ＤＯＩ：１０．１５９５５?ｊ．ｉｓｓｎ１０００３９２４．２０１５．０１．２１ 文章编号：１０００３９２４（２０１５）０１０９２０４ 玉米赤霉烯酮快速间接竞争酶联免疫检测技术研究及应用 １，２ ２ ２ ２ ２ １ １ ２ 刘　刚 ，韩　铮 ，聂冬霞 ，杨俊花 ，赵志辉 ，李和平 ，廖玉才 ，武爱波 １ （华中农业大学植物科学技术学院，麦类作物分子生物技术实验室，武汉４３００７０； ２上海市农业科学院农产品质量标准与检测技术研究所，上海２０１４０３） 摘　要：在获得高特异性单克隆抗体的基础上，通过间接竞争酶联免疫检测技术建立了一种在室温下 （２５℃）快速、定量检测玉米赤霉烯酮的方法。该方法前处理简单，检测时间仅３０ｍｉｎ，检出限为０．３ ｇ?ｋｇ，线 μ 性范围０．５—１０ ｇ?ｋｇ，回收率为７６．７％—１０４．２％。应用此方法测定了１６份小麦、玉米等谷物样品中玉米赤霉 μ 烯酮的含量，其中小麦９份、玉米７份，检出率为６９％，含量在５．１２—４００．０２ ｇ?ｋｇ，其中２份样品为阳性。同时 μ 该ＥＬＩＳＡ检测结果与ＬＣＭＳ?ＭＳ的验证结果无显著性差异。因此，该新型快速、定量的ＥＬＩＳＡ技术对小麦、玉米 样品中玉米赤霉烯酮的大范围筛查具有一定的应用价值。 关键词：玉米赤霉烯酮；酶联免疫吸附测定；快速检测；小麦；玉米 Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｆａｓｔｉｎｄｉｒｅｃｔｃｏｍｐｅｔｉｔｉｖｅ ｅｎｚｙｍｅｌｉｎｋｅｄｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔａｓｓａｙｏｆｚｅａｒａｌｅｎｏｎｅ １，２ ２ ２ ２ ２ ＬＩＵＧａｎｇ ，ＨＡＮＺｈｅｎｇ，ＮＩＥＤｏｎｇｘｉａ，ＹＡＮＧＪｕｎｈｕａ，ＺＨＡＯＺｈｉｈｕｉ， １ １ ２ ＬＩＨｅｐｉｎｇ，ＬＩＡＯＹｕｃａｉ，ＷＵＡｉｂｏ １ （ＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｆｏｒＷｈｅａｔ，ＢａｒｌｅｙａｎｄＯａｔｓ，ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＰｌａｎｔＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， ２ ＨｕａｚｈｏｎｇＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｗｕｈａｎ４３００７０，Ｃｈｉｎａ；ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＡｇｒｏＦｏｏｄＱｕａｌｉｔｙＳｔａｎｄａｒｄｓａｎｄ ＴｅｓｔｉｎｇＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＳｈａｎｇｈａｉＡｃａｄｅｍｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２０１４０３，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａｍｅｔｈｏｄｔｏｒａｐｉｄｌｙａｎｄｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｌｙｄｅｔｅｃｔｚｅａｒａｌｅｎｏｎｅａｔｒｏｏｍｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ（２５℃）ｗａｓｄｅ ｖｅｌｏｐｅｄｂｙｉｎｄｉｒｅｃｔｃｏｍｐｅｔｉｔｉｖｅｅｎｚｙｍｅｌｉｎｋｅｄｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔａｓｓａｙｏｎｔｈｅｂａｓｉｓｏｆｏｂｔａｉｎｉｎｇｔｈｅｍｏｎｏｃｌｏｎａｌａｎ ｔｉｂｏｄｙｗｉｔｈｈｉｇｈｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ．Ｔｈｅｍｅｔｈｏｄｗａｓｓｉｍｐｌｅｉｎｐｒｅｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ，３０ｍｉｎｉｎｄｅｔｅｃｔｉｎｇｔｉｍｅ，０．３ ｇ?ｋｇｉｎｄｅ