ABCB4基因的研究进展.docVIP

　　ABCB4基因的研究进展 【关键词】 ABCB4基因 作用 应用 　　近年来，随着对ABCB4基因(ATP binding cassette transporter A4)的深入研究发现，ABCB4基因及其编码的蛋白在胆汁及其脂类转运中起重要作用。ABCB4基因编码的蛋白是一种磷脂酰胆碱易位酶，可以将磷脂酰胆碱转移人胆汁 ，乳化胆汁中的胆盐，保护胆管上皮免受胆盐损伤［1］ 。ABCB4基因的突变可能会导致胆管损伤，从而引起胆汁淤积，继而引起多种疾病的发生。本文就目前研究进展做一综述。 　　1 ABCB4基因的分子结构和特点 　　ABCB4基因位于人类第 7条常染色体长臂 2区 1带 1 亚带 （7q21．1)，开始于第 85，566，809 bp pter，终止于第85，642，313 bp pter．共有 75，504个碱基．跨越74kb和包含28个外显子(平均145bp，范围55一259bp )，其中 27个具有编码序列［2］。认为第一外显子包含一个26bp的非翻译的CpG富含序列，其在ABCB4 cDNA 3.27，表现为ABCB4 cDNA的一个主要部分。第二个外显子开始在6位置相当于ATG起始密码子的腺嗦吟的位置。12个跨膜结构域中8个被分离的外显子所编码。跨膜结构域3和4的N一末端那半和它们的同源对应物9和10的C一末端那半共享一个外显子。细胞质的核昔结合位点各自被三个外显子编码(外显子12,13,14，和25,26,27)。外显子28编码C一末端的68氨基酸，其被一个非翻译的由55个多聚核昔A所组成的尾所延伸。 绝大部分的内显子在密码子之间中断编码的外显子，命名为O型内显子。从外显子2,5,6，和8的N一末端和从外显子22,23的C一末端的第二个核昔酸之后中断密码子，而外显子4是在第一个核昔酸之后。 　　2 ABCB4基因的分布 　　ABCB4基因主要在肝脏毛细胆管膜上高度表达，编码多药耐药蛋白3(multidrug resistance protein 3，MDR3)，而在啮齿类动物则编码多药耐药蛋白2（MDR2），Smith JJM等Dl对ABCB4基因在人类组织的分布的研究表明MDR3(和他的小鼠的同源基因mdr2)分布在肝脏的肝细胞的小管膜上。此外，还在心肌细胞，骨骼肌细胞和脾脏B淋巴细胞区有较低程度的表达，但没有发现ABCB4 Pgp的表达，可能与ABCB4基因的低水平表达相关［3］。Patel等［4］采用RTPCR分析ABCB4基因在人的正常胎盘上表达情况，发现了ABCB4基因的表达，并得出妊娠晚期ABCB4基因表达上调并且为妊娠早期的4倍。 　　3 ABCB4的生物学作用 　　ABCB4位于7q21.1，其编码的MDR3和与小鼠同源的MDR2的生物学作用一直不知道，对ABCB4的作用机制了解主要来自于对鼠MDR2研究 。Gummadi等［5］发现了MDR2在小鼠磷脂跨膜转运中发挥关键作用。MDR2基因编码一种跨膜蛋白，起到类似于翻转酶的作用，可以将磷脂翻转进入毛细胆管。MDR2基因剔除后小鼠丧失了分泌磷脂进入胆汁的能力，其胆汁酸盐分泌水平不变。在人类，与之相对应的蛋白是MDR3，即ABCB4，属于ABC转运家族。直到Smit等［6］开发出mdr2等位基因缺失的小鼠(mdr2 一或mdr2裸鼠)，发现这种小鼠完全不能分泌卵磷脂进人胆汁。后来Oude Elferink等［7］的研究发现卵磷脂的分泌即依靠胆盐也依靠mdr2Pgp。如果任何一个缺失那么都将看不到卵磷脂的分泌。如果胆盐的浓度一定，卵磷脂的分泌依靠mdr2 Pgp的浓度。在野生型的小鼠mdr2 (+/+)中卵磷脂的分泌比在杂合小鼠mdr2 （ +/-)高。而在转MDR3基因的小鼠中其分泌最高，其内的卵磷脂的跨膜转运子的浓度高于生理水平。而在mdr2(-/-)小鼠中卵磷脂的分泌非常低。因此推测MDR3基因编码卵磷脂的跨膜转运子。 　　目前，ABCB4基因及其编码的MDR3功能已经明确，该蛋白为磷脂输出泵，如同磷脂翻转酶，将卵磷脂从毛细胆管膜双分子层的内侧转运到外侧，而卵磷脂在对胆盐诱导的胆管粘膜损伤起到保护作用。当ABCB4基因变异时，由于磷脂的缺乏，胆盐与磷脂构建的混合微胶粒不能形成，胆盐游离，将引起胆管细胞损伤导致胆汁淤积，可导致Ⅲ型进行性家族性肝内胆汁淤积症(progressive familial intrahepatic cholestasisⅢ，PFIC3)和妊娠期肝内胆汁淤积症。［8］ 　　由ABCB4基因编码翻译的 P糖蛋白 (Pglycoprotein，PgP)Pgp3，是ABCB4的产物，主要在肝脏表达 ，是 ABC(ATPbinding cassette， ABC)转运体家族的成员之一。肝细胞