丹赤胶囊对子宫内膜异位症体外培养细胞上清液中细胞.docVIP

　　丹赤胶囊对子宫内膜异位症体外培养细胞上清液中细胞 【摘要】 目的 研究丹赤胶囊对子宫内膜异位症患者体外培养细胞上清液中单核细胞趋化因子-1(MCP-1)、肿瘤坏死因子(TNF-α)和可溶性细胞间粘附分子-1(sICAM-1)的水平及细胞活性的影响。方法 实验分为丹赤大、中、小剂量组及空白对照组、丹那唑对照组。采用ELISA法和MTT法,观察异位内膜细胞培养上清液中MCP-1、TNF-α和sICAM-1的水平及细胞活性。结果 丹赤大剂量组明显降低TNF-α的水平；丹赤大、中剂量组能明显降低MCP-1的水平。结论 丹赤胶囊通过降调参与子宫内膜的粘附种植-血管生成-浸润发展3个阶段的细胞因子的水平及活性,抑制子宫内膜细胞的粘附、种植和进一步生长。 【关键词】 子宫内膜异位症；丹赤胶囊；细胞因子 　　Abstract：Objective To reaserch the effect of Danchi capsule on the changes of monocyte chemotactic protein-1 (MCP-1) and tumor necrosis factor-α (TNF-α) and solution intercellular adhesion molecule-1 (sICAM-1) of cell supernatant of eutopic endometrium in patients etriosis. Methods Cells edium, small dosage group, blank group and dannazol group in control, detected by ELISA method and MTT method. To observe the levels of MCP-1, TNF-αand sICAM-1 of eutopic endometrial cells and cell activity. Results The group of DanChi large dosage decreased significantly the level of TNF-α, the group of Danchi large and medium dosage decreased the level of MCP-1 significantly. Conclusion Danchi capsule may descend and inhibite the production and activity of these cytokines plantation-angiogenesis-progression and infiltration, then inhibit adhesion and implantation of endometrial cells. 　　Key etriosis；Danchi capsule；cytokine 　　 　　子宫内膜异位症 (Endometriosis,EM)是生育年龄妇女的多发病、常见病,发病率一般在10%～15%,不孕患者中可高达30%～58%,其发病率呈逐年上升趋势。子宫内膜异位症的发生、发展是一个多因素参与的复杂过程,此过程主要与子宫内膜细胞的粘附种植-血管生成-浸润发展这3个阶段有关。期间涉及众多细胞因子的参与,如促粘附分子(ICAM-1)、促炎性因子(MCP-1)及肿瘤坏死因子(TNF-α)等。本实验研究通过体外培养子宫内膜异位症卵巢异位内膜细胞,观察丹赤胶囊对异位内膜细胞分泌细胞因子及细胞活性的影响,探讨丹赤胶囊治疗子宫内膜异位症的作用机理。 　　1 材料与方法 　　1.1 标本的采集 　　协和医院2003年7月经腹腔镜确诊为巧克力囊肿患者3例,年龄27～35岁；北京大学附属人民医院2003年7－12月经腹腔镜及开腹手术确诊卵巢巧克力囊肿10例,年龄26～41岁。所取的标本置于盛有冰DMEM/F12培养液的无菌瓶中,立即送实验室。所有患者术前3个月均未使用激素及其他药物治疗。 　　1.2 主要试剂及药物 　　人TNF-αELISA试剂盒96T(晶美生物工程有限公司产品),人MCP-1和sICAM-1 ELISA试剂盒96T(上海森雄科技实业有限公司产品),DMEM/F12干粉、胶原酶Ⅱ型、胰蛋白酶(1∶250,美国GiBCO公司产品)。丹赤胶囊：0.35 g/粒(江苏康缘药业股份有限公司生产)；丹那唑胶囊：200 mg/粒(江苏联环药业股份有限公司生产)。 　　1.3 体外细胞培养方法 　　1.3.1 原代培养 　　参照文献[1]方法并略作改进：将所获组织用DMEM/F12培养液洗涤3次,剪成约