鸭血浆胆碱酯酶的分离纯化和性质的研究-华中农业大学.pdf

※基础研究 食品科学 2005, Vol. 26, No. 4 91 鸭血浆胆碱酯酶的分离纯化和性质的研究 1 1 2 2 1 刘 畅 ，陈福生 ，李书谦 ，路 磊 ，邢淑婕 (1.华中农业大学食品科技学院，湖北 武汉 430070 ；2 .湖北省农业科学院，湖北 武汉 430070) 摘 要：将鸭血浆用0.2mol/L pH7.2 磷酸盐缓冲溶液等体积稀释后，以硫酸铵为盐析剂进行二次盐析、再经DEAE- 52 离子交换层析和Sephadex G-200 凝胶过滤层析对胆碱酯酶进行分离纯化，可获得电泳纯的胆碱酯酶，纯化倍数 为2 7 8 .5 倍，酶活回收为17 . 8% 。实验表明，该酶的最适温度为37 ℃，最适p H 为7 . 8 ，有过量底物抑制现象。 关键词：胆碱酯酶；鸭血浆；盐析；离子交换层析；凝胶过滤层析 Purification of Cholinesterase from Duck Serum 1 1 2 2 1 LIU Chang ，CHEN Fu-sheng ，LI Shu-qian ，LU Lei ，XING Shu-j ie (1.College of Food Science and Technology, Huazhong Agriculture University, Wuhan 430070, China； 2.Hubei Academy of Agricultural Sciences, Wuhan 430070, China) Abstract ：Cholinesterase from duck serum was purified to electrophoretic homogeneity by salting out twice with ion-exchange chromatography on DEAE-cellulose and gel filtration on Sephadex G-200. The enzyme was purified 278.5-fold and the activity recovery 17.8% percent was obtained. Studies on the properties of the Cholinesterase showed that the optimum temperature was 37 ℃and the optimum pH was between 7.5～8.0. The enzyme would be inhibited by excess butyryl-thiocholine iodide. Key words：Cholinesterase；du ck seru m ；salt ou t ；ion-ex chan g chrom atography ；gel filtration 中图分类号：Q556 文献标识码：A 文章编号：1002-6630(2005)04-009 1-04 近年来，由于农药的大量使用和不合理的使用， 法等，但仪器昂贵，操作过程复杂、费时及检测成本 [ 3 ] 导致农产品尤其是果蔬产品农药残留过量，严重地危害 高，也不适用于现场监测 。近年来，胆碱酯酶抑制 [ 1]