景天三七中总黄酮提取条件和含量分析.docVIP

　　景天三七中总黄酮提取条件和含量分析 【摘要】 目的：研究不同提取溶剂对景天三七中总黄酮的含量影响及最佳提取条件下总黄酮的含量。方法：采用盐酸镁粉法和醋酸铅法对景天三七中总黄酮进行检识，并用不同溶剂对景天三七中总黄酮进行了提取，以分光光度法测定总黄酮含量，以芦丁为标准品，以10%Al(NO3)35%NaNO2为显色剂，在508nm波长处进行测定。结果：检识试验证明景天三七中含有黄酮类物质，且最佳提取溶剂为80%乙醇(Plt;0.05)。在此提取条件下，测得景天三七中总黄酮的含量为18.39mg·g-1，RSD为2.2%(n=5)。总黄酮测定线性范围为15.20～45.60μg·mL-1(r=0.999 7)，平均回收率为95.74%，RSD为0.98%(n=6)。结论：景天三七中黄酮类物质的最佳提取溶剂为80%乙醇。本法准确可靠，重现性好，结果稳定，适合于景天三七中总黄酮含量分析。 【关键词】 景天三七;黄酮;分光光度法 　　【ABSTRACT】 Objective：To study the extracting conditions and determination for total flavonoids in Sedum Aizoon L. ine the flavonoids in Sedum Aizoon L. by HCl  Mg and Pb(AC)2 reactions. Rutin ixed solution of 10%Al(NO3)3～5%NaNO2.The total flavonoids in Sedum Aizoon L. etry at 508nm,and series of extracting solvents Aizoon L. and the best extracting solvent of all L-1(r=0.999 7)for total flavonoids.The average recovery ethods g·g-1 Aizoon L.ethod Aizoon L. 　　【KEY Aizoon L.,Flavone,Spectrophotometry 　　景天三七(Sedum Aizoon L.)为景天科景天属植物，别名土三七、费菜、血散、养心草，性平，味甘，微酸，无毒，有凉血止血，散瘀，消炎，安神，镇痛等作用[1],景天三七的广泛用途越来越多地被人们所接受。研究表明，景天三七中含有没食子酸等多种酚酸以及谷甾醇、多糖等成分[25]，但有关景天三七中黄酮类成分的研究较少。而黄酮类化合物具有抗肿瘤、抗癌、解热、保肝、抗衰老等作用[6]。我们通过对景天三七中总黄酮的提取条件和含量进行研究，对进一步研究景天三七的药用价值具有指导意义。 　　采用水及不同浓度的乙醇溶液为提取溶剂，利用分光光法测定总黄酮的含量，比较不同溶剂对景天三七中总黄酮提取效率的影响。 　　1 材料与方法 　　1.1 仪器 　　721分光光度仪(上海)，A/D分析天平(1/10万，日本)，万分之一天平(上海)，电热恒温水槽(上海)。 　　1.2 试药 　　野生景天三七(根)采自河北省张家口，由我校王德富老师鉴定。芦丁对照品购自中国生物制品检定所，其余试剂均为分析纯，试验用水为二次去离子水。 　　1.3 实验方法 　　1.3.1 景天三七中黄酮类化合物检识 　　取景天三七药材的干燥粉末42.7g在沸水浴中进行提取2h，对提取液中黄酮类物质进行检识。本试验按文献[7]采用两种方法检识。第一种方法为盐酸镁粉反应，向提取液中加少许镁粉，振摇，然后滴加几滴浓盐酸，几分钟后溶液中上升泡沫呈红色;第二种方法向提取液中加醋酸铅溶液，生成棕黄色沉淀。通过以上两种方法可知景天三七中含有黄酮类物质。 　　1.3.2 标准曲线绘制 　　1.3.2.1 芦丁标准溶液的配制 准确称取120℃干燥恒重的芦丁标准品15.20mg，用95%乙醇溶解，定容至50.00mL，摇匀，得浓度为0.304 0mg·mL-1的芦丁标准溶液。 　　1.3.2.2 吸收曲线的制作 取上述芦丁标准溶液1.20mL于10mL比色管中，加水至3.00mL，加入5%亚硝酸钠水溶液0.50mL，混匀，放置6min。加入10%硝酸铝0.50mL，摇匀，放置6min后加入4%氢氧化钠3.00mL，混匀，用蒸馏水定容至10.00mL，摇匀，放置15min。以试剂作空白，在470～530nm波长范围内测定吸光度[8]。以波长(λ)为横坐标，吸光度(A)为纵坐标作图，得吸收曲线。 　　1.3.2.3 标准曲线的制作 分别取上述芦丁标准溶液0.00mL，0.50mL，0.60mL，0.90mL，1.20mL，1.50mL，1.80mL于7只10mL比色管