甲状腺乳头状癌基因谱表达的初步研究.docVIP

　　甲状腺乳头状癌基因谱表达的初步研究 【摘要】 　　目的：利用基因芯片筛选与甲状腺乳头状癌发生、发展和与恶性度相关的基因。方法：分别选取高、低分化甲状腺乳头状癌组织标本，抽提、纯化mRNA，同法再纯化同患者的正常甲状腺组织的mRNA；用Cy5荧光染料对甲状腺乳头状癌组织mRNA作探针标记，以Cy3荧光染料对正常黏膜组织的mRNA作探针标记，一同和可检测4 096个基因片段的BiostarH40 s型基因芯片进行杂交得到的双色荧光标记芯片，将之分别扫描入计算机，进行结果分析。结果：高、低分化2种芯片上均有大量基因片段出现了的高/低表达的情况，高分化芯片上异常表达片段数量为低表达351条，高表达417条，低分化芯片上异常表达者为低表达410条，高表达415条。在2种芯片中均有相同表达差异趋势的基因片段中，共计有90条基因片段出现低表达，其中随恶性度增高而降低的基因有19条；有78条片段呈现高表达状态，其中随恶性度增高而表达增加的有25条。表达异常的片段功能较分散；有大量的不明功能的片段发现。结论：甲状腺乳头状癌的发生、发展不能用单一的基因变异解释，而是由多基因共同作用的结果，并且变异具有明显的个体性差异；甲状腺乳头状癌的恶性度与多个基因片段异常表达相关。很多新发现的片段的功能不明了，对于确定甲状腺乳头状癌的发生发展内在机制仍有待研究。 【关键词】 基因芯片；基因表达；甲状腺癌 　　［ABSTRACT］Objective: To screen genes that ent and malignance of papillary thyroid carcinoma using cDNA microarray. Method: Ta tissue alignance degree and samples from normal thyroid tissue RNA extraction and purification. Marked the purified mRNA from carcinoma tissue RNA from normal tissue ix these tRNA probes together and then hybridize to the cDNA microarray. If Cy3 signal is stronger, the spot on the microarray eans loeans overexpressed gene. Experiment gets 2 pieces of doublecolor cDNA microarrays and then they a tissue and normal thyoid tissue in their gene fragments expression. In the ents presented. To the poorly differentiated chip, the correspondence number ents ents ilar expression trend, of ed correlated to malignant degree. Large quantity of genes ent and malignance degree of papillary thyroid carcinoma is resulted from different kinds of abnormality of polygenes not a single gene. Since functions of many gene fragments has been unknoa 甲状腺癌是头颈部最常见的恶性肿瘤，病理分型上分为4种：乳头状癌、滤泡型癌、髓样癌、未分化癌，其中又以乳头状癌(papillary thyroid carcinoma， PTC)所占比例最大，约为70%左右，故而获得了更多的研究关注。在以往的文献中，对于乳头状癌异常基因片段表达情况的研究多为某一片段，难于产生较为全面的认识。本实验即利用基因芯片对甲状腺乳头状癌的基因进行大规模片段的研究，对其基因谱表达作一初步分析。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 　　1.1.1 标本制备 　　所有病例均来自哈尔滨医科大学附属肿瘤医院。术前选择单侧甲状腺发生肿瘤病例，手术中切取肿瘤组织和对侧腺体正常组织，分别进行液氮冷冻保存。术后根据病理诊断，确定为单侧甲状腺乳头状癌者标本留用，否则筛除。最终样本皆为女性。 　　1.1.2 基因芯片 　　上海博星公司产BiostarH40 s基因芯片。 　　1.1.3 实验试剂 　　均由上海博星公司对外试验室提供，包括TRIzol，