结膜细胞外基质与羊膜在结膜重建中的实验研究.docVIP

　　结膜细胞外基质与羊膜在结膜重建中的实验研究 【摘要】 目的：观察结膜细胞外基质(extracellular matrix，ECM)与羊膜作为结膜组织的替代材料用于结膜成形的特点及效果。方法：饲养30只新西兰白兔，将其中6只白兔的球结膜制成结膜ECM,并将剩余的白兔随机分为实验组和对照组，每组12只;实验组兔结膜采用组织工程技术制备的结膜ECM行结膜移植修补术，对照组采用低温冷冻保存的羊膜移植，以观察移植修补术后结膜成形的情况，并行肉眼、镜下、免疫组化及淋巴细胞毒检查。结果：实验组结膜ECM移植后1周可见新生血管自移植边缘长入，8周时外观已接近正常结膜，无免疫排斥反应，光镜下可见移植后4周的移植区上皮已接近正常结膜上皮;对照组术后4周移植区仍有部分上皮未覆盖。结论：结膜ECM为目前比较理想的结膜替代材料，并可有效地用于角膜、结膜表面重建。 【关键词】 细胞外基质;结膜;羊膜;移植 　　Abstract Objective: To investigate the characteristics and the effect of conjunctival extracellular matrix (ECM) and Amniotic membrane as a succedaneum for conjunctiva. Methods: 30 Neent. The conjunctival defect models ade of bulber conjunctiva from six rabbits and then all others ly divided into the test group(12 Rabbits) and the control group(12 rabbits). The conjunctival defect in the test group niotic membrane. All of them ined by light microscope , immunohistochemical examination and lymphocyte toxicity test. Results: There e mildly congestive and similar to normal conjunctival ones in the 8th munologic rejection. Epithelium in the grafts could be seen through the light microscope to groal one 4 4 for conjunctiva in conjunctiva transplantation and could be used as a graft to reconstruct ocular surface as atrix; Conjunctiva; Amniotic membrane; Transplantation 　　结膜损伤是临床上较为常见的眼科疾病，表现为结膜瘢痕形成、睑球粘连、眼球运动障碍、干眼，严重者可出现假性胬肉及角膜混浊、进行性角膜结膜化或血管化，导致视力下降，不仅影响美观，而且也常是致盲的主要原因，严重影响患者的生活质量。因此，长期以来，眼科医师一直研究结膜损伤的治疗方法，对于创面较大的结膜损伤，保守治疗是无效的，只能通过手术修复来解决。而结膜损伤修复重建手术的关键是结膜替代物。因而人们一直致力于结膜替代物的研究，如最早的自体结膜、异体结膜、口腔黏膜及鼻黏膜等黏膜组织，Polytef异物移植膜等。 　　近年来，在眼表研究方向取得重大突破，使羊膜移植在结膜损伤的修复重建中应用比较广泛。随着组织工程技术的兴起，人们对细胞外基质(extra cellular matrix,ECM)进行了广泛的研究。我们将结膜ECM、羊膜进行结膜缺损修复比较，为进一步证实结膜ECM作为一种有前景的结膜替代物提供有力的证据。 　　1 材料与方法 　　1.1 实验动物 选用新西兰白兔30只，雌雄不限，体重3±0.2 kg，无任何眼表疾病，选用豚鼠(荷兰猪)12只，体重300±20 g。 　　1.2 脱细胞结膜ECM 取6只饲养的新西兰白兔结膜送至北京大学清源伟业生物制品公司进行脱细胞处理，制成结膜ECM。 　　1.3 实验方法 　　1.3.1 动物分组 将24只健康、体重为3kg的大白兔随机分成2组，即实验组12只，采用结膜ECM行移植修补术;对照组12只，采用低温冷冻的羊膜移植。 　　1.3.2 动物模型的制备 给兔肌注苯巴比妥8 mg/kg和氯丙嗪12.5 mg/kg作麻醉，冲洗右眼结膜囊，右眼滴0.5 %丁卡因表麻液，开睑器开睑，无菌条件