生导Part-8-2.pptx

第五节 突变与遗传疾病;（一）染色体畸变;? 多倍体（Polyploidy) 一些突变体具有多于两倍的整套染色体数。 3N (Triploidy) 4N (Tetraploidy) ;减数分裂中的染色体不分离;人的染色体 23对/46条;孕妇的年龄与先天愚型发病率的关系 ; 人类中一些染色体数目异常的疾病;果蝇性染色体的正常分离;果蝇性染色体的不正常分离; 2.染色体结构的改变 缺失 ( Deletion ) 重复 ( Duplication ) 易位 ( Translocation ) 倒位 ( Inversion );染色体结构的改变 ;46, XY(5p-);5号染色体部分缺失综合症 又称为猫叫综合症 (Cri-du-chat Syndrome) ;果蝇棒眼突变体 Ｘ-linked 16A region repeated (Dominant);? 缺失的应用 常作为一种研究手段探测某些调控元件和蛋白质的结合位点 （缺失突变体）。 ? 重复的应用 植物多倍体育种。;多倍体育种;三倍体无籽西瓜;多倍体在植物育种中的应用;（二）基因突变;同义突变;移码突变;3.基因突变的意义 ? 可遗传的突变给进化提供了新的材料 ? 基因的多样性(如等位基因) ? 为生物适应环境提供了条件 ;镰刀型细胞贫血症的基因突变;地中海贫血症的各种基因突变;正常红细胞;（三）遗传病的基因诊断; 产前诊断;苯丙酮尿症（Phenylketonuria, PKU);亨廷顿舞蹈病（Huntingtons Disease）;杜氏肌营养不良症（Duchenne Muscular Dystrophy）;2.诊断方法及其它扩展运用 ? 核酸分子杂交技术 (Southern blot) ? 聚合酶链式反应技术 (PCR) ? 限制性片段长度多态性分析技术 (RFLP); DNA 片段的分离——凝胶电泳;;变性 ;RFLP （限制性片段长度多态性分析 ）;DNA指纹法与司法鉴定;亲权鉴定;第六节 基因工程;（一）基因工程原理;2.基因工程诞生的分子生物学基础 ? 理论上的三大发现 ? 生物遗传物质是 DNA（20 世纪 40 年代） ? DNA 分子的双螺旋结构和半保留复制机制（20世纪 50 年代 ) ? 遗传信息传递方式的确定（20 世纪 60 年代） ; ? 技术上的三大发明 ? DNA限制性核酸内切酶和DNA连接酶 1970年, Smith 和 Wilcox 在细菌中首次分离并纯化到可对DNA特定片段进行定点切割的酶。 1967年,５个实验室几乎同时发现了DNA连接酶。 ? 基因工程的载体 质粒，病毒载体等 ? 逆转录酶 1970年, Temin 和 Baltimore 在RNA肿瘤病毒中发现了逆转录酶—真核基因的制备成为可能。 ;DNA限制性内切酶 识别特定的DNA顺序并酶切 ;3.基因工程的基本内容 ?目的基因的获得: DNA限制性内切酶片段分离 人工合成DNA PCR扩增 逆转录合成cDNA ; cDNA合成;Word文件：;文件大小比较;;? 基因工程载体 特点: 复制起始点（可以自主复制） 可筛选标记（抗性基因?抗生素） 多克隆位点（通过酶切和连接插入外源片段） 易于分离纯化 如：质粒(Plasmid)、噬菌体、粘粒（cosmid)、YAC、BAC等。 ;pSC101 (Stanley Cohen分离的第101个质粒);限制性内切酶片段;?重组DNA的构建 目的片段与载体的连接 ?重组DNA的转化与扩增 ;克隆的筛选;克隆是一种无性繁殖过程，产生相同细胞群体或相同DNA分子的过程。 克隆是一个亲本细胞产生成千上万个相同细胞组成的群体。 ;（二）基因工程的应用;(1) 胰岛素 胰岛素是治疗糖尿病的特效药，过去长期以来只能依靠从猪、牛等动物的胰腺中提取，100Kg胰腺只能提取4-5g的胰岛素。 基因工程胰岛素: 将合成胰岛素的基因导入大肠杆菌，每2000L培养液就能产生100g胰岛素。 (2) 干扰素 干扰素可以治疗病毒感染。过去从人血中提取，300L血才提取1mg。 基因工程人干扰素α-2b（安达芬）是我国第一个全国产化基因工程人干扰素α-2b，具有抗病毒，抑制肿瘤细胞增生，调节人体免疫功能的作用，广泛用于病毒性疾病治疗和多种肿瘤的治疗。;发酵设备;2. 转基因植物;表达萤光素酶基因的 转基因烟草;抗除草剂矮牵牛 ;转基因动物;转生长激素基因小鼠; 超级三文鱼 （重量增加11倍） ;