血管性痴呆动物模型的初步探讨.docVIP

　　血管性痴呆动物模型的初步探讨 【关键词】 血管性痴呆动物模型 初步探讨 ［Abstract］ObjectiveTo make animal model of vascular dementia.MethodsThis experiment for the aged ethod ed by Pulsinelli-Brierley 4 blood vessel occlusion.ResultsThrough rats sming the aze and step-doental group shoemory and the cell appeared the dropsy or dead in their hippocampal region.ConclusionThe aged rat is aphronesia through ia，ode of vascular demented animal. ［Key entia;animal model;rat 血管性痴呆（VD）是由一系列脑血管因素导致脑组织损害引起的痴呆综合征。患者表现为记忆及认知等功能障碍综合征，不仅严重损害患者的健康，影响患者的生命质量，也给家庭和社会带来沉重的负担。在我国11个城市流行病学调查结果发现，60岁以上人群中，VD的患病率为324/10万人口，老年性痴呆（AD）为238/10万人口，VD占各类痴呆的第一位。VD患者的平均生存时间为41个月，5年内死亡率达60％以上［1］。并且随着人类社会的老龄化，VD已是国内外医学界研究的重要课题，由于对本病的发病机制尚不十分明确，亦缺少治疗本病的特效药物，因此建立理想的VD动物模型对于探明VD的病因、病理过程以及寻找和筛选防治药物具有重要意义。大鼠较其他动物价格便宜、生存率高、繁殖快、易饲养,且其脑血管解剖和生理接近人类,因此大鼠是目前制备VD模型最适宜的动物。本实验采用高脂血症加改良的四血管阻断法制作VD模型，为VD研究提供了另一种可行的实验室方法,现介绍如下。 1材料与方法 1.1模型的制做 1.1.1实验动物选择7个月左右的l/mg体重)腹腔麻醉后，沿背侧正中切开，暴露出双侧第一颈椎横突翼小孔，用直径0.5 mm的电凝针灼烧在翼小孔中走行的椎动脉，造成永久性闭塞；24 h后，大鼠取仰卧位固定，沿颈正中切开，分离出双侧颈总动脉，然后用微动脉夹夹闭双侧颈总动脉，每次5 min，共夹闭3次，每次间隔5 min，此为脑缺血期，25 min后结束夹闭颈总动脉为再灌注期。大鼠术中均保证有自主呼吸，术后放回笼中常规饲养观察。对照组大鼠不做椎动脉电凝和颈总动脉断流，其余过程与实验组相同。 1.2大鼠学习、记忆测试方法 1.2.1水迷宫方法采用中国科学院药物所研制的水迷宫，水迷宫由半透明有机玻璃制成(80 cm×50 cm×21 cm)，其有4个盲端，终点处有一个高出水面的安全台。放水深23.0 cm，水温22 ℃～28 ℃，并保持各处水温均匀，水无色澄清，水迷宫周围的空间标志在实验过程中保持不变［2］。制备模型前令对照8 d、12 d组，再灌注8 d、12 d组大鼠学会游水迷宫，学会游水迷宫标准：沿正确路线从起点到达终点，并能连续3次到达这个标准，每次所需时间不超过2 min。 1.2.2跳台方法跳台装置为60 cm×12 cm×33 cm的被动回避反应箱，四周用黑色塑料板分隔，箱底为可通电的铜栅，反应箱的右后角放置一直径和高均为4.0 cm的绝缘橡皮垫，作为大鼠回避电击的安全台，由调压器调节电压提供交流电。实验时，将大鼠放入此装置中适应5 min然后立刻通以40 V交流电，动物受电击后,其正常反应是跳到安全台躲避电击，其跳到安全台前受电击的次数为错误次数［3］。 1.3形态学观察灌注和切片：各组大鼠在完成实验当天（再灌注8 d、12 d）给予腹腔麻醉(戊巴比妥钠30 mg/100 g体重)，暴露心脏，剪开右心耳，在左心室插管，先用200 ml生理盐水灌冲，然后4％多聚甲醛溶液(PBS、0.1 mol/L、pH 7.4)灌注后，取出脑组织，将其浸于相同甲醛液中48 h后，常规漂洗、脱水，石蜡包埋，连续切片，备HE、免疫组化染色使用。 1.4观察指标（1）对照8 d、12 d组，缺血再灌注8 d、12 d组大鼠术前术后游水迷宫5 min入盲端错误次数及游全程所需时间。（2）对照8 d、12 d组，缺血再灌注8 d、12 d组大鼠术前术后通电5 min内错误次数及受电击时间。（3）光镜观察大鼠脑组织缺血前后形态学变化。 1.5统计学分析各组试验数据以均数±标准差（x±s）表示,应用SPSS 11.0统计软件进行统计学分析，组间比较采用t检验，组内比较采用单因素方差分析(两两比较采用LSD)进行统计学