两种食品防腐剂与牛血清白蛋白相互作用 - 西华师范大学学报(自然 .pdf

第３６卷 第４期 西 华 师 范 大 学 学 报 （自然 科 学 版 ） ２０１５年 １２月 　 Ｖｏｌ３６ Ｎｏ４ ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎａＷｅｓｔＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ） Ｄｅｃ．２０１５ 文章编号：１６７３５０７２（２０１５）０４０３６００７ 两种食品防腐剂与牛血清白蛋白相互作用 李　田，程正军，曹丽君，蒋晓慧 （西华师范大学　ａ．化学化工学院；ｂ．四川省化学合成与污染控制重点实验室，四川 南充　６３７００９） 摘　要： 运用多光谱技术研究纳他霉素／乳酸链球菌素（ｎａｔａｍｙｃｉｎ／ｎｉｓｉｎ）与牛血清白蛋白（ＢＳＡ）间的相互作用．结 果表明：ｎａｔａｍｙｃｉｎ和 ｎｉｓｉｎ与 ＢＳＡ间的猝灭机理分别为静态猝灭和联合猝灭．ｎａｔａｍｙｃｉｎ／ｎｉｓｉｎ绑定 ＢＳＡ位点 Ｉ从而 导致 ＢＳＡ结构变化．此外，计算了这两个绑定反应的结合常数、结合位点数和结合距离． 关键词： 牛血清白蛋白；纳他霉素；乳酸链球菌素；荧光光谱；结合常数 中图分类号：Ｏ６５　　　文献标识码：Ａ　　　ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３－５０７２．２０１５．０４．００８ ［１］ 纳他霉素（ｎａｔａｍｙｃｉｎ）和乳酸链球菌素（ｎｉｓｉｎ）是常用的食品防腐剂．例如，ＯｌｌéＲｅｓａ等 报道含有ｎａｔａ ［２］ ｍｙｃｉｎ的可食性木薯淀粉比直接将它喷洒到奶酪表面对奶酪的防腐效果好．最近，Ｚｈａｎｇ等 的研究表明含 ［３］ 有 ｎｉｓｉｎ的Ｄ柠檬烯纳米乳剂对４种食品表面上微生物的防腐效果更好．此外，Ｋａｌｌｉｎｔｅｒｉ等 调查了ｎａｔａ ｍｙｃｉｎ与ｎｉｓｉｎ混合对 Ｇａｌｏｔｙｒｉ奶酪保质期的影响，结果发现直接加入 ｎａｔａｍｙｃｉｎ或它与ｎｉｓｉｎ混合对这种奶酪 的保质期均比只用 ｎｉｓｉｎ的长．但是它们对人体健康具有潜在的危害，如 ｎａｔａｍｙｃｉｎ能引发姐妹染色单体交 ［４］ 换、染色体变异和人淋巴细胞中微核的形成 ．ｎａｔａｍｙｃｉｎ／ｎｉｓｉｎ与蛋白质的相互作用知识对理解 ｎａｔａｍｙｃｉｎ／ ｎｉｓｉｎ的毒理性、特异性、转移运输和新陈代谢至关重要．到目前为止，ｎａｔａｍｙｃｉｎ／ｎｉｓｉｎ与蛋白质的相互作用 特性仍然未知．因此，研究蛋白质与 ｎａｔａｍｙｃｉｎ／ｎｉｓｉｎ间的相互作用具有重要意义． 在血液循环系统中，血清白蛋白是主要的可溶性蛋白质，在转移一些有机和无机化合物包括金属离子方 面扮演重要的角色．在血清白蛋白中，牛血清白蛋白（ＢＳＡ）已被广泛用作一个模型来评估蛋白质与有机小 ［５］ 分子间的相互作用，因为它与人血清白蛋白的结构相似度高达７６％ ．在本文中，采用多光谱技术（荧光、三 维荧光、ＵＶｖｉｓ吸收和ＦＴＩＲ光谱）探讨了ｎａｔａｍｙｃｉｎ／ｎｉｓｉｎ与 ＢＳＡ的结合特性（如：ＢＳＡｎａｔａｍｙｃｉｎ／ｎｉｓｉｎ体系 的荧光猝灭机理，结合位点数，结合力，等）．此外，几种常用离子对这两个绑定反应的影响也被调查． １　材料与方法 １．１　材　料 ＢＳＡ（纯度９８％，Ｍ＝６８０００）购于罗氏公司，且使用前没有进一步纯化；ＢＳＡ的溶液在０．０５Ｍ的磷酸缓 冲液中制备．Ｎａｔａｍｙｃｉｎ（９９％纯度）和ｎｉｓｉｎ（９９％纯度）分别购于阿拉丁化学有限公司和上海乐香生物有限 公司．其它化学药品均为分析纯，无需进一步纯化，所有溶液保存在４℃．整个实验过程中使用的水均为二 次蒸馏水． １．２　方　法 所有荧光光谱均在 ＣａｒｙＥｃｌｉｐｓｅ荧光分光光度计（Ｖａｒｉａｎ，ＵＳＡ）上测量，且该仪器配有电子恒温装置． 固定 ＢＳＡ的浓度为５．０Ｍ，ｎａｔａｍｙｃｉｎ／ｎｉｓｉｎ的浓度从０逐渐