2,7－二氯荧光素荧光法测定饲料样品中的微量砷.doc

目 录 摘 要 关键词 实验部分 1.1 实验原理： 1.2 主要仪器和试剂 1.3 实验方法 2 结果与讨论 2.1 实验方法 2.2 酸度对As3+与I2反应完全程度的影响 2.3 试剂及指示剂加入顺序的影响 2.4 荧光素及I2用量选择 2.5 溶液酸度的影响 2.6 设置时间的影响 2.7 标准曲线绘制 2.8 检测限 3 样品的制备 4 样品的处理 5 样品分析 5.1 样品测定 5.2回收率和精密度实验 参 考 文 献 致 谢 2,7－二氯荧光素荧光光度法测定饲料中的总砷 汤月贞 指导老师：范文秀 (河南科技学院 化工系002) 摘 要: 研究了以2,7－二氯荧光素为指示剂，荧光法间接测定微量As3+ 的新方法，在pH＝6.5-7.5缓冲介质中，I2 与2，7－二氯荧光素反应，使2，7－二氯荧光素的荧光猝灭，当加入As 3+ 与I2反应，使体系荧光增强，体系的荧光发射波长为λem=520nm。测定了猪浓缩饲料,玉米，麸皮总砷的含量，该方法的检出限为1.0μg.L-1线性范围20－100μg /mL,相关系数r=0.9996。 关键词: 荧光法 2，7－二氯荧光素 砷 Abstrast: A rapid,simple and sensitive fluorimetric new method has been developed for the determination of trace amount of arsenic(III) with 2,7,--dich lorofluoresce in as fluorogenic reagent (λem=520nm)at pH 5.5—7.5, In a neutral medium,I2 reacts with 2,7-dich lorofluoresce to produce a non-fluorescene compound. If arsenic(III) is present, the fluorescene intensity of the solution increases with the increasing concentration of As3+ when appropriate amounts of I2 and 2,7-dich lorofluoresce in are added. A linear calibration curve was obtained in the range of 20-100μg/mL,the detection limit is 1.0μg/mL,the variation coefficient is 0.9996. Keywords: Fluorimetricmethod 2,7-dichlorofluorescein arsenic 砷及含砷化合物毒性较大，被列为食品卫生监督的重点监测元素[1]，目前，测定砷的方法有紫外可见分光光度法[2] ,色谱法[3]，原子吸收法[4]，极谱法[5]，本文提出的2，7－二氯荧光素－I2 - As3+ -反应体系测定As3+的新荧光分析法。本法灵敏度高选择性好，操作简便，体系荧光稳定，测定线性范围宽，成功的用于猪浓缩饲料和玉米及麸皮中的微量砷的测定。 1 实验部分 1.1 实验原理： 饲料中的砷经消化后，用预还原剂还原成As3+，经萃取后，定容，作为待测液，在 选定的最佳条件下，测定荧光值。 1.2 主要仪器和试剂 RF-960荧光分光光度计 As3+标准溶液：准确称取0.1320gAs2O3溶于2.0mL10%NaOH溶液中，稍加热并用玻璃棒搅拌之，溶解后，调节pH=6-7，移入100mL容量中，摇匀，此溶液含As3+1.000g.L-1作为储备液，临用时再用蒸馏水稀释至1.00mg.L-1作为使用液。 5×10-5mol.L-12,7-二氯荧光素溶液，准确称取0.0100g2,7-二氯荧光素于烘干的小烧杯中，用少量无水乙醇溶解，然后转入500mL容量瓶中，用蒸馏水，定容，摇匀。 20.00mg.L-1I2溶液，用无水乙醇配制1.00g.L-1的碘储备液，临用时用无水乙醇稀释为20.00mg.l-1的溶液。 缓冲溶液，按常规法配制pH=6.4的磷酸氢二钠，磷酸二氢钾溶液。称取23.85g磷的二氢钠，5.2g磷酸二氢钾混合与烧杯中用蒸馏水溶解，定容为500mL。 混合还原剂（5%抗坏血酸＋5%硫脲）：称取5g抗坏血酸和5g硫脲混合，用去离子水溶解定容到100mL（临用前现配）。 所有试剂均为分析纯，所用水为二次蒸馏水。 1.3 实验方法 准