与自噬相关蛋白becline1相互作用的猪伪狂犬病毒蛋白的筛选与鉴定.pdf

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　　　　２０１７（０２上）：１４－１７，２８７ 与自噬相关蛋白Ｂｅｃｌｉｎｅ１相互作用的 猪伪狂犬病毒蛋白的筛选与鉴定 １，２ ２ ２ ２ ２ ２ ２ 侯琳琳 ，孙明霞 ，王海明 ，汤艳东 ，刘永刚 ，涂亚斌 ，姜成刚 ， ２ ２ １，２ 王淑杰 ，王　刚 ，蔡雪辉 （１．东北农业大学，哈尔滨 １５００３０；２．中国农业科学院 哈尔滨兽医研究所兽医生物 技术国家重点实验室，哈尔滨１５０００１） 中图分类号：Ｓ８５８．２８；ＴＱ９３７ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００４－７０３４（２０１７）０２－００１４－０５ 关键词：猪伪狂犬病毒；自噬；Ｂｅｃｌｉｎｅ１；ＵＬ３６；ｐｕｌｌ－ｄｏｗｎ；蛋白相互作用 摘　要：为了对与自噬相关蛋白Ｂｅｃｌｉｎｅ１相互作用的猪伪狂犬病毒蛋白进行筛选和鉴定，试验进行 了ｐｕｌｌ－ｄｏｗｎ、Ｓｈｏｔｇｕｎ质谱分析和免疫共沉淀（Ｃｏ－ＩＰ）以及激光共聚焦检测。结果表明：病毒蛋白 ＵＬ３６与Ｂｅｃｌｉｎｅ１之间可能存在相互作用关系；ＵＬ３６－１与Ｂｅｃｌｉｎｅ１蛋白之间具有稳定的相互作用 关系，相互作用区域位于ＵＬ３６的去泛素酶区域；ＵＬ３６－１与 Ｂｅｃｌｉｎｅ１共定位于胞浆中。说明自噬 相关蛋白Ｂｅｃｌｉｎｅ１与猪伪狂犬病毒蛋白ＵＬ３６的去泛素酶区域存在相互作用。 Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇａｎｄｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｐｏｒｃｉｎｅｐｓｅｕｄｏｒａｂｉｅｓｖｉｒｕｓｐｒｏｔｅｉｎｓ ｉｎｔｅｒａｃｔｅｄｗｉｔｈａｕｔｏｐｈａｇｙ－ｒｅｌａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎＢｅｃｌｉｎｅ１ １，２ ２ ２ ２ ２ ＨＯＵＬｉｎｌｉｎ ，ＳＵＮＭｉｎｇｘｉａ，ＷＡＮＧＨａｉｍｉｎｇ，ＴＡＮＧＹａｎｄｏｎｇ，ＬＩＵＹｏｎｇｇａｎｇ， ２ ２ ２ ２ １，２ ＴＵＹａｂｉｎ，ＪＩＡＮＧＣｈｅｎｇｇａｎｇ，ＷＡＮＧＳｈｕｊｉｅ，ＷＡＮＧＧａｎｇ，ＣＡＩＸｕｅｈｕｉ （１．ＮｏｒｔｈｅａｓｔＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａｒｂｉｎ１５００３０，Ｃｈｉｎａ；２．ＳｔａｔｅＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＨａｒｂｉｎＶｅｔｅｒｉｎａｒｙ ＲｅｓｅａｒｃｈＩｎｓｔｉｔｕｔｅ，ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｈａｒｂｉｎ１５０００１，Ｃｈｉｎａ） Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｐｏｒｃｉｎｅｐｓｅｕｄｏｒａｂｉｅｓｖｉｒｕｓ（ＰＲＶ）；ａｕｔｏｐｈａｇｙ；Ｂｅｃｌｉｎｅ１；ＵＬ３６；ｐｕｌｌ－ｄｏｗｎ；ｐｒｏｔｅｉｎ－ｐｒｏｔｅｉｎｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏｓｃｒｅｅｎａｎｄｉｄｅｎｔｉｆｙｐｏｒｃｉｎｅｐｓｅｕｄｏｒａｂｉｅｓｖｉｒｕｓ（ＰＲＶ）ｐｒｏｔｅｉｎｓｉｎｔｅｒａｃｔｅｄｗｉｔｈａｕｔｏｐｈａｇｙ－ｒｅｌａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎＢｅｃｌｉｎｅ１，ｔｈｅｍｅｔｈｏｄｓ ｏｆｐｕｌｌ－ｄｏｗｎ，Ｓｈｏｔｇｕｎｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙａｎａｌｙｓｉｓ，ｃｏ－ｉｍｍｕｎｏｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎ（Ｃｏ－ＩＰ）ａｎｄｌａｓｅｒｃｏｎｆｏｃａｌｄｅｔｅｃｔｉｏｎｗｅｒｅｕｓｅｄｉｎｔｈｅｔｅｓｔ． ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｒｅｍｉｇｈｔｂｅａｎｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｖｉｒａｌｐｒｏｔｅｉｎＵＬ３６ａｎｄＢｅｃｌｉｎｅ１，ａｎｄｔｈｅｒｅｗａｓａｓｔａｂｌｅｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅ