利用工程大肠杆菌生产不同类型的游离脂肪酸 - qibebt-ir - 中国 .pdf

利用工程大肠杆菌生产不同类型的 游离脂肪酸 1 ，2 1 ，2 2 ，3 1 ，* 2 ，* 李玲玲 ，刘 强 ，郑艳宁 ，秦 文 ，咸 漠 (1.四川农业大学食品科学学院，四川雅安6250 14 ; 2. 中国科学院青岛生物能源与过程研究所，山东青岛26610 1 ; 3. 中国科学院研究生院，北京100049) 摘 要:游离脂肪酸(free fatty acids，FFAs)对食品风味能够产生重要的影响，生产更多类型的FFAs 能够更好的满足食 品工业的需求。通过在大肠杆菌(E.coli)中分别过量表达7 种不同的硫酯酶基因，7 个用于生产FFAs 的重组菌株被成 功构建。并对重组菌株的FFAs 生产条件进行了优化，确定最佳的培养条件为:以15g / L Na HPO 和7.5g / L KH PO 2 4 2 4 作为培养基中的磷酸盐浓度，采用0.25mmol / L 的异丙基硫代－ β－ D－ 半乳糖苷(IPTG)在30 ℃ 进行诱导培养。在优化 的培养条件下，7 个重组菌株的FFAs 通过气相色谱(GC)进行了定性和定量分析。结果显示，过量表达BTE 、AtFatA 、 ‘tesA 的重组菌株LL1、LL2 、LL4 均显著提高了FFAs 的产量，其中LL1 取得了346.4mg / L 最高的FFAs 产量。进一步对 LL1、LL2 、LL4 的FFAs 组成进行分析表明，BTE 、AtFatA、‘TesA 具有不同的底物特异性，能够用来生产C12 ～ C18 等不 同链长和饱和度的FFAs 。因此，通过微生物代谢工程可以获得天然动植物油脂中不存在的更多类型的FFAs 。 关键词:游离脂肪酸，工程大肠杆菌，硫酯酶 Production of different types of free fatty acids by engineered E.coli LI Ling－ling1，2 ，LIU Qiang1，2 ，ZHENG Yan－ning2 ，3 ，QIN Wen1，* ，XIAN Mo2 ，* (1.College of Food Science ，Sichuan Agricultural University ，Ya ’an 6250 14 ，China ; 2.Qingdao Institute of Bioenergy and Bioprocess Technology ，Chinese Academy of Sciences，Qingdao 26610 1，China ; 3.Graduate University of Chinese Academy of Sciences，Beijing 100049 ，China) Abstract :Free fatty acids (FFAs)play a key role in the flavor of many foods. To better meet the needs of flavor ind ustry ，it is needed to prod uce more d ifferent types of FFAs. Seven