荧光法研究光诱导肌红蛋白的去氧过程 - 中国科学.pdfVIP

中国科学 B 辑 :化学 2008 年 第 38 卷 第 1 期 : 55 ~ 59 SCIENCE IN CHINA PRESS 荧光法研究光诱导肌红蛋白的去氧过程 ① ①② * ① ①② ① ① ① 马君燕 , 郑学仿 , 郭明 , 唐乾 , 马静 , 高大彬 , 胡皆汉 ① 辽宁省生物有机化学重点实验室, 大连大学, 大连 116622; ② 大连大学生物工程学院, 大连 116622 * 联系人, E-mail: dlxfzheng@163.com 收稿日期: 2007-02-10; 接受日期: 2007-09-25 国家自然科学基金(批准号:、辽宁省优秀人才培养计划项目(批准号: RC-04-10)和辽宁省高校创新团队支持项目(批准号: 2006T002) 摘要 用荧光光谱法对光诱导下肌红蛋白的去氧过程进行了研究. 含氧肌红蛋白在光照下发生 关键词 去氧作用, 光照量越大, 去氧量越大; 光照下的温度越高, 去氧越快; N2 可以把肌红蛋白活性中心 肌红蛋白 铁卟啉中的配位氧脱下来, 因而可用荧光光谱法作含氧肌红蛋白与各种气体相互作用的去氧研 荧光光谱 究. 此外, 荧光光谱法还可用作肌红蛋白中色氨酸和酪氨酸残基与铁卟啉之间的传能研究. 光诱导 去氧 1 引言 素、毒性分子(主要是染料)与蛋白质相互作用的研究, 并可用同步荧光法考察蛋白质的构象. 本文则是应用 现今光谱方法已被广泛地应用于蛋白质结构的 研究. 传统的X 晶体衍射法只适用于晶体结构的研究. 荧光光谱法研究肌红蛋白在光诱导下的去氧过程. 但是对蛋白质结构研究的最新发展不仅利用它的晶 含血红素(Fe-卟啉)蛋白质与配体结合的动力学 体形式, 而且更需要了解它在溶液中的结构、功能与 研究是分子生物学中的一个经典课题, 其中氧气又 物理性质. 随着基因工程和生物技术应用的迅速发 是研究此类配体动力学中的一个重要的配体. 国外 展, 应用于溶液中蛋白质结构的光谱方法研究, 已引 对具有储存和输送氧气功能的含血红素蛋白质与配 起人们的极大兴趣. 圆二色谱(CD)、荧光、紫外(UV)、 体O2, CO, NO[4]等结合的动力学研究, 多以较稳定和 红外(IR)与拉曼光谱(传统的、共振的、时间分辨的) 最容易光解的MbCO为模型[5]. 在采用光谱方法研究 [6] [7] 是几种可以揭示在溶液中蛋白质结构和功能的光谱 时, 多使用共振拉曼光谱 、表面增强拉曼光谱 、 [1] 时间分辨红外光谱[8,9] 、圆二色光谱[10]、时间分辨圆二 方法 . 荧光法是一种已广泛应用的现代分子光谱分析方 色光谱[11]和紫外、原子吸收光谱[12,13]等方法, 使用荧光 法, 因其具有灵敏度高、选择性高、信息量丰富、检测 光谱法研究含氧肌红蛋白的去氧过程, 目前未见报道. 极限低等特点, 逐渐受到了科研工作者的青睐. 荧光法 本文以 Sigma 公司生产的肌红蛋白为样品, 采 应用的范围很