膨胀床吸附高效纯化牛血红蛋白.pdf

维普资讯 第 54卷 第 9期 化 工 学 报 V01．54 №9 2003年 9月 Journal of Ch~nical Industry and Engineering (C~na) Septem~r 2003 膨胀床吸附高效纯化牛血红蛋 白 路秀玲 赵东旭 金业涛 苏志国 (中国科学院过程工程研究所生化工程 国家重点实验室，北京 100080) 摘 要 探索 了将膨胀床吸附层析应用于动物血液蛋白质 的提取 ，尝试 了直接从牛血红细胞破碎液中纯化血红 蛋 白．对该过程采用的吸附介质及 pH值 、离子强度 、温度、洗脱条件等因素对高铁血红蛋白生成、产品纯度 以 及 回收率等的影响进行探索．选择 了最佳吸附介质StreamlineSP，确定了优化的吸附条件为 ：吸附过程选用离子 强度为 10mmolL· 的磷酸盐缓冲系统，进料线流速3．3锄 ·min一 ，进料 pH值6．6，改变缓冲液 pH值为 7．2进 行洗脱 ，操作温度 4℃．该技术省去了离心去除碎片步骤 ，有效地控制 了纯化过程 中无载氧能力的高铁血红蛋 白的生成 ，动态吸附容量达到 70～75mg·ml～，只经一步操作产 品纯度达 电泳纯 ，高铁血红蛋 白含量仅为 5．4％．与现有的膜过滤 一层析纯化方法相比，膨胀床吸附法操作时间短，提取收率高，产 品活性损失小，是一 种简捷、高效、适合工业放大的天然血红蛋 白制备方法． 关键词 膨胀床吸附 纯化 牛血红蛋白 StreamlineSP 中圈分类号 1’Q033 文献标识码 A 文章编号 0438—1157 (2003)09—1257—07 EFFICIENT SEPARATION AND PURIFICATION 0lFBOⅥ NE HE I【]IG IBIN USING EXPANDED BED ADSoRPrI1ION LU Xiuling，ZHAO Dongxu。JIN YetaoandSU Zhiguo (NationalLaboratoryofBiochemicalEngineering，InstituteofProcess Engineering，ChineseAcademyof Sciences，Beijing100080，hC ina) Abstract Directseparation and purification Ofhemoglobin from fresh bovine hemolysatewerestudied with expanded bed adsorption． Ionic strength，pH and temperature had greatinfluence on the formation of methemog lobin intheprocess．7五epurityna drecoveryoftheproductwere alsoinfluencedbythesefactors．7 e ocnditionsforadosrptionnadelutionwereoptimized．ThebeStpe rformancewasobtainde byusing 10mmol·L一 phosphatebufferoslution，pH 6．6．Eluting atpH 7．2wascarride outatlow ionicstrength na d thefinal recovery ofhemoglobinWas morethna 80％．A low temperatureof4 ℃ in theprocessWas necessary f