系统性红斑狼疮患者外周血B淋巴细胞中狼疮活动相关miRNA的筛选论文.pdfVIP

第 43卷第2期 温 州 医 学 院 学 报 Vb1．43NO．2 2013年 2月 JournalofWenzhouMedicalCollege Feb．2O13 I l 系统性红斑狼疮患者外周血B淋巴细胞中 狼疮活动相关miRNA的筛选 陈芳 ，陈朝生 ，章慧娣 ，薛向阳。，丁晓凯 ，孙莉。，陈丹。，黄朝兴 (温州医学院，浙江 温州 325000，1．附属第一医院 肾内科 ；2．微生物学与免疫学教研室 ；3．附属 第一医院 风湿科) [摘 要] 目的：通过筛选系统性红斑狼疮 (SLE)惠者外周血B淋巴细胞中与狼疮活动相关的microRNA (miRNA)，探讨B淋巴细胞参与SLE发病的机制。方法：选取45例重度活动期SLE患者作为研究对象，另 选20例稳定期SLE患者和 lo例健康体检者分别作为对照，采集外周静脉血，用磁珠阴性分选法分离B淋 巴细胞并提取RNA，将每组单个样本RNA混成组总RNA，进行组间芯片分析。实时荧光定量PCR(Realtime PCR)验证miRNA芯片检测结果。结果：重度活动期SLE患者外周血B淋 巴细胞中有l6条差异表达的miRNA， 其中下调 1O条，上调6条。RealtimePCR对其中2条 (miR一181a、miR-103)miRNA的验证结果与芯片检 测所示具有较好的一致性。结论：SLE患者病情活动性与B淋巴细胞中miRNA异常表达密切相关。 [关键词] 红斑狼疮，系统性；miRNA；免疫磁珠；B淋 巴细胞；芯片 [中图分类号] R593．24 [文献标志码] A [文章编号] 1000-2138(2013)02—0106—06 ScreeningofthemiRNAsrelatedtodiseaseactivityinperipheralbloodB lymphocytesofsystemiclupus erythematosuspatients CHEN Fang1．CHEN ChaoshenglZHANG Huidil，XUEXiangyang2,DINGXiaokail， SUNLi3,CHENDan．HUANGChaoxing．J．DepartmentofNephrology,theFirstAffiliatedHospitalofWenzhou MedicalCollege，Wenzhou，325000；2．DepartmentofMedicalMicrobiologyandImmunology,WenzhouMedical College．Wenzhou．325000；3．DepartmentofRheumatology,theF{rStAffiliatedHospitalofWenzhouMedical College，Wenzhou，325000 墨圆圆● Objective：ToexplorethepathogenesisofBlymphocytesparticipatedinSLEthroughthe screeningofthemicroRNAs(miRNAs)relatedtolupusactivityinperipheralbloodBlymphocytesofsystemic lupuserythmatosus(SLE)patients．Methods：Forty-fivecasesofsevereactiveSLEpatientsastheresearch object，20casesofremissionSLEpatientsand15healthycontrolsascontrolgroupswereselectedrespectively． TheperipheralEDTA anticoagulationbloodwasobtainedtoextractmiRNAsinB lymphocytesseparatedby magneticcellsortingsystem ，mixalloftheRNAofBlymphocytesinhtesamegroup，andcomparedhtemi RNAs profileofthese3groupsonetoonebythemiRNA microarra