发育生物学教学课件004-翻译水平调控.pptVIP

翻译和翻译水平的调控 定义 翻译（translation）又称为蛋白质的生物合成的同义词。使mRNA上由DNA来的遗传信息转变为蛋白质的氨基酸（20种）排列顺序。即将核酸序列转变为氨基酸序列。 真核细胞表型的差异主要是其编码蛋白质基因表达不同引起的。 ???????? tRNA（transfer RNA, 转移RNA） 概念 tRNA将mRNA和正在合成的多肽联系起来 遗传密码决定了多肽中氨基酸的特异顺序 氨酰tRNA合成酶将氨基酸连到tRNA上，然后tRNA与相应的密码子进行碱基配对 核糖体协调和催化蛋白质合成 所有蛋白质必须折叠才能具有功能，有些必须被切成片段和进行化学修饰，有一部分必须将其内含肽去除 蛋白质更新导致不再需要其功能的蛋白质降解 分子生物学的中心法则 复制 DNA RNA 蛋白质 参与蛋白质生物合成的物质包括： 1．?? 三种RNA ???????? mRNA（messenger RNA, 信使RNA） ???????? rRNA（ribosomal RNA, 核蛋白体RNA） 2．?? 20种氨基酸(AA)作为原料 3．?? 酶及众多蛋白因子，如IF、eIF 4．?? ATP、GTP、无机离子 1. tRNA在蛋白质合成中的作用 tRNA将mRNA和正在合成的多肽联系起来，既是一种物理连接，同时也是一种信息连接； tRNA确保合成多肽的氨基酸顺序通过遗传密码与mRNA的核苷酸序列对应。 氨酰化：将氨基酸连到tRNA上 密码子-反密码子相互作用：tRNA与mRNA相连接 2. 核糖体在蛋白质合成中的作用 通过将mRNA、氨酰tRNA和相关的蛋白因子放置在彼此相互正确的位置来协调蛋白质合成； 核糖体的成分催化翻译过程中的一部分化学反应。 核糖体的结构 每个核糖体都由两个亚基组成； 真核细胞核糖体大亚基含三种rRNA（28SrRNA、5.8SrRNA 和5SrRNA)， 细菌大亚基含二种rRNA（23SrRNA、和5SrRNA)； 两类生物中，小亚基均只包含一种rRNA,分别为18SrRNA和16SrRNA； 两个亚基都与一些核糖体蛋白相联系（见后图）。 3. 翻译的具体过程 翻译过程从阅读框架的5′-AUG开始，按mRNA模板三联体密码的顺序延长肽链，直至终止密码出现。整个翻译过程可分为：翻译的起始(initiation)、延长(elongation)和终止(termination )。 细菌的翻译起始需要一个内部核糖体结合位点； 真核细胞的翻译起始由帽子结构和Poly(A)尾介导。 翻译过程 起始 延伸 终止 起始因子 延伸因子 终止因子 翻译过程示意图 真核生物的翻译起始: 前起始复合物与mRNA连接 前起始复合体包括核糖体的40S亚基、起始tRNAiMet、真核细胞起始因子eIF-2和一分子的GTP。 前起始复合物沿mRNA扫描，直至遇到起始密码子。扫描由eIF-4A和eIF-4B协助，它们具有解旋酶活性。 翻译起始反应示意图 真核生物翻译起始复合物形成 1．核蛋白体大小亚基分离； 2．起始氨基酰-tRNA结合； 3．mRNA在核蛋白体小亚基就位； 4．核蛋白体大亚基结合。 起始肽链合成的氨基酰-tRNA 真核生物： Met-tRNAiMet （甲硫氨酸）； 原核生物： fMet-tRNAifMet （甲酰甲硫氨酸）。 肽链合成起始： 指mRNA和起始氨基酰-tRNA分别与核蛋白体结合而形成翻译起始复合物 (translational initiation complex)。 原核生物翻译起始复合物形成 1．核蛋白体大小亚基分离； 2．mRNA在小亚基定位结合； 3．起始氨基酰-tRNA的结合； 4．核蛋白体大亚基结合。 肽链合成延长： 指根据mRNA密码序列的指导，次序添加氨基酸从N端向C端延伸肽链，直到合成终止的过程。肽链延长在核蛋白体上连续性循环式进行，又称为核蛋白体循环(ribosomal cycle)，每次循环增加一个氨基酸，包括以下三步： –???进位(entrance) –???成肽(peptide bond formation) –???转位(translocation) 肽链合成的终止 当mRNA上终止密码出现后，多肽链合成停止，肽链从肽酰-tRNA中释出，mRNA、核蛋白体等分离，这些过程称为肽链合成终止。终止相关的蛋白因子称为释放因子(rele