原发性肝癌线粒体DNA微卫星不稳定性分析.pdfVIP

原发性肝癌线粒体DNA微卫星不稳定性研究 一一／…一～ 摘 要 ／ 、 ／基因不稳在肿瘤的发生中起重要作用。这种基因不稳包括两种不同的 形菲其一为染色体不稳，即肿瘤抑制途径：另一为微卫星不稳定性 (microsatellite 发现，线粒体MSI在肿瘤的发生发展过程中起重要作用。线粒体DNA (mtDNA)独立于细胞核DNA之外，能独立进行复制、转录和翻译，具 有非常活跃的自我复制能力。线粒体DNA是一条全长为16569bp的双链 闭环分子。与核基因组相比，其分子量小，缺乏组蛋白保护，易受致癌物 攻击，且其缺乏损伤修复系统，因此是致癌物的重要靶点。此外由于线粒 体内氧浓度很高，易产生自由基及过氧化氢等物质，它本身又不能合成谷 胱甘肽而将这些过氧化物有效地清除，因此线粒体及mtDNA易受氧化性 损伤。肝癌的发生主要涉及到肿瘤抑制途径，少有涉及微卫星不稳途径。 关于这方廊，国内外尚缺乏深入研究。 实剃耳的：研究线粒体DNA微卫星不稳(mtMSI)在原发性肝癌发 生中的作用，以及它与核DNA微卫星不稳(nMSI)的关系，进一步阐明 肝癌的分子发病机理，为其临床诊断、治疗和预防提供新的思路。 材料方法：以本院1992年至1998年手术切除的肝癌组织为研究对象 (癌旁正常肝组织做对照)，样本总数52例。采用PCR扩增、聚丙烯酰胺 凝胶电泳和银染方法，检测肝癌mtMSI和nMSI。mtMSI的检测包括2个 控制区(D—loop区)和5个编码区的mtDNA微卫星位点，nMSI的检测选 择BAr26位点。 o、结果：(1)D-loop区的(C)n重复序列检测到8例阳性，阳性率为 15．38％；(CA)n重复序列检测到2例阳性，阳性率为3．85％。编码区NDl 位点检测到2例阳性，阳性率为3．85％；ND2位点检测到l例阳性，阳性 VI 率为1．92％；COIII位点无阳性发现；ND5位点(C)6 and(A)8重复序列检测 到2例阳性，阳性率为3．85％；ND5位点(CCT)3and(AGC)3重复序列无阳 据患者性别、年龄、是否合并乙型肝炎病毒感染(HBsAg阳性)和肝硬化、 AFP是否阳性，将52例样本进行分组。统计结果显示，肝癌mtMSI发生 样本中，有10例表现mtMSI。r 结论：(1)mtMSI不但存在于胃肠道等肿瘤，也存在于原发性肝癌中， 可能在部分原发性肝癌的发生中起重要作用。(2)肝癌mtMSI与患者性别、 年龄、是否合并乙型肝炎或肝硬化、AFP是否阳性无相关性。(3)D．100p nMSI在原发性肝癌中并非常见，提示肝癌nMSI的发生可能与错配修复基 因突变无关，而涉及到其他的分子途径。(5)肝癌mtMSI与nMSI并无明 确相关关系。(6)对线粒体基因不稳、突变和表达进行深入研究，不仅有助 于揭示原发性肝癌的发病机理，而且可能为其临床诊断、治疗和预防提供 的新思路。 关键词：麓琵}重体微卫星不稳定性肝癌 谝峨性 ／ f VII In Microsatellite TheMitochonddalDNA InstabilityPrimary Carcinoma Hepatocellular Abstract Genetic all roleintheoccurrenceof instability tunlors． playsimportant This includestwodifferent