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(简)微生物菌种高通量筛选技术与装置(王永红)
动物细胞培养用微型反应器 专用菌落琼脂柱打孔器 微型化平台应用 总结:高通量筛选技术的优势(1) 操作平行性 结果可比性 效率(一周到一个月完成常规方法一年的工作量) 成本:人力、时间、空间、经济 总结:高通量筛选技术的优势(2) 1. 高产菌株的筛选 数量性状:1—多关系,无模型,依靠筛选数量 如:赖氨酸高产菌株筛选 质量性状:0—1关系,有模型,无需庞大筛选数量。 如:赖氨酸缺陷菌株筛选 其他:各种氨基酸、有机酸、维生素、抗生素、生物基产品等高产筛选 总结:高通量筛选技术的优势(3) 2. 发酵原材料(培养基)的生物检验 直接检验原材料的应用效果 精细调节原材料的配比和用量 不同原材料与菌株的对应关系 特点:建立原材料数据库和菌株数据库 长期性、基础性工作 谢谢! * * The entire development of the Orbitor is focused on operational efficiency. Thus it is PC driven, no external controller is required. Combine this with it’s light weight and compact design, you now have a mover that can keep pace with the ever changing needs of the lab. We’ve maximized the Orbitor’s infinite rotational capability by integrating a re-grip station right in the base, thus eliminating the added complexity of an additional rotating gripper. High performance has NOT been at the expense of safety. This is definitely a bench-top mover and the robot stops and logs an error when it encounters minimal resistance. 操作灵活性 PC driven微机控制 No controller required无需其它控制装置 Add-on storage capability可搭配存储能力 Small footprint小的占地空间和轨迹 Feed up to 4 instruments with ease可连接4台仪器 Fits within a wide variety of bio safety cabinets适应多种型号的生物安全柜 内容提纲 高通量筛选在微生物育种中的重要意义 菌种高通量筛选技术国际进展 高通量筛选技术应用示范 高通量筛选技术 Scale up Scale down 微型化 高通量 标准化 对高通量筛选技术存在认识上的误区 认为微型化只要按比例缩小即可,忽略参数相关性问题;对操作条件的平行性没有足够的认识 仅注重培养环节高通量,忽略其他步骤匹配和瓶颈的转移问题 对标准化重于最优化的认识不足 高通量筛选是提高成功几率的一种技术手段 菌种高通量筛选技术组成 高通量 前处理技术 高通量 培养技术 高通量液体 处理技术 高通量 转接种技术 高通量克隆 制备技术 菌种库 管理技术 高通量数据 管理技术 高通量分析 检测技术 菌种高通量 筛选技术 分析测试 高通量培养 菌种资源 菌种高通量筛选技术 通量匹配 限制瓶颈在不断克服和转移 菌种高通量筛选技术 菌种高通量筛选技术是一整套高通量技术的有机整合和合理匹配 红霉素生产菌株的微型化培养及分析 菌落库 孔板培养 离心 移液 检测 高通量 微型化培养 就摇瓶与微孔板之间的生理发酵参数和动力学参数进行了研究,以证实微型化培养方法的可行性,为红霉素产生菌高通量筛选奠定了基础。 微型化培养--动力学参数比较 t1 t2 t3 t4 t5 t6 摇瓶 30〞 31〞28 29〞20 34〞22 37〞 28〞30 12孔板 (2.5ml) 8〞97 8〞61 8〞59 9〞11 9〞32 8〞87 摇瓶 12孔微孔板 kLa(h-1) 105.2 88.4 2.1 氧气传递系数 2.2物料混合 流场特性 OTR 与混合 三、国家生化工程中心的高通量筛选工作基础 微型化培养--发酵参数比较 2.3 生物效价 2
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