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脐血干细胞低温保存的试验研究
张继刚 赖艳华张传聚
(山东大学能源与动力工程学院, 济南250061)
摘要脐血干细胞是治疗恶性血液病、肿瘤等多种疾病的最为有效的方法之一,实现脐血干细胞的长期
低温保存对临床应用具有非常重要的意义。在传统“两步法”的基础上进行了试验研究,提出了 “三步
冻存法”的概念;并通过25例冻存前后的和3年内长期保存的62例脐血干细胞的生物性能的研究发现,
“三步冻存法”实现脐血干细胞的长期保存是切实可行的。
关键词脐血干细胞三步冻存法长期保存
EXPERIMENTALSTUDYONTHECRYOPRESER:v.ATl0NOF
BLOODSTEM
UMBILICALCORD CELLS
LaiYanhua
Jigang
Zhang ZhangChuanju
andPower
(SchoolofEnergy Engineering,ShandongUniversity,Jinan,250061)
AbstractBasedontheresearchofthetraditional forwarda of
two·stepmethod,put conceptionthree—step
usedit tofreezeumbilicalstem
method,and cells.Theresultsshowsthe
cryopreservation three-step
methodisafeasibleto stem
theumbilicalcells.
cryopreservation preserve
Umbilicalcordbloodstemcell methodFormal
Keywords Three—stepcryopreservation preservation‘
改进基础上,提出了“三步冻存法”的概念,并对
0 前言
长期保存的脐血干细胞的各项生物性能进行了试
自从1989年世界上首例脐血干细胞移植的成验研究。
功,迄今为止已成为治疗恶性血液病、肿瘤等多种
1 方法
疾病的最为有效的方法之一u。31,实现脐血干细胞的
长期保存,对其应用于临床具有非常重要的意义。 1.1脐血干细胞的制备
而实现长期保存的关键就是保证其各项生物学特
性不受或少受损失H1。影响其保存的因素有很多, 法…,经低:高速离心后分离出干细胞(Nc)。再按
主要有:冷冻保护剂的用量和种类、冷却速率、长 Kogler的方法嘴’,在冰水浴中向浓缩分离后的NC
期保存过程气液相温度的变化、‘冻融速率和试 细胞中注入在4C环境下放置过的DMSO(二甲基亚
验条件等曲1。 砜)以及低分子右旋糖酐混合液.(DMSO的终浓度
目前,干细胞的冷冻保存普遍采用“两步法” 10%),这样就得到了研究需要的脐血干细胞样本。
进行哺1,就是以l℃/min的降温速率降至.60。C,然
后将样本快速投入液氮中冻存。国内对其长期保存
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