脐血间充质干细胞表达的IDO对异基因淋巴细胞的增殖及再生障碍性贫血小鼠造血恢复的影响论文.pdfVIP

第42卷第 1期第 51页 华中科技大学学报 (医学版) Vo1．42 No．1 P．51 2013年 2月 ActaMedUnivSciTechnolHuazhong Feb． 2013 脐血间充质干细胞表达的IDO对异基因淋 巴细胞的 增殖及再生障碍性贫血小鼠造血恢复的影响* 李玉云， 魏晓巍 ， 李 见 ， 王 露 ， 张英杰， 张 强△ 蚌埠医学院临床检验诊断学系，蚌埠 233030 摘要 ：目的 探讨脐带血间充质干细胞(UCB-MSCs)发挥免疫调节作用机制及对再生障碍性贫血小 鼠的治疗效应 。 方法 采集足月胎儿脐带血，采用羟乙基淀粉沉降+淋巴细胞分离两步法分离培养 UCB-MSCs。观察细胞形态，流式细 胞术检测细胞表面标志物，成骨、成脂诱导鉴定分化潜能。研究 UCB-MSCs表达吲哚胺 2，3-过氧化酶 (IDO)的情况。建 立UCB-MSCs与异基因淋巴细胞共培养体系，探讨其发挥免疫调节作用的机制；同时构建免疫介导再生障碍性贫血小 鼠模型，观察其对再障造血恢复的影响。结果 UCB-MSCs为成纤维样细胞，贴壁生长。流式细胞仪检测结果表明，其 不表达造血标志 CD34，高表达 CD44、CD73，体外成功诱导成骨与成脂分化。经 7干扰素(IFN一7)诱导表达 IDO活性，对 异基因淋巴细胞的增殖可能发挥免疫抑制作用。MSCs输注再生障碍性贫血小鼠模型，可减轻小鼠骨髓造血衰竭程度。 结论 UCB-MSCs在体外成功分离培养，并具有间充质干细胞生物学特性；MSCs可能通过 IDO途径发挥免疫负调控作 用。Uc MsCs的IDO表达对于免疫介导再障小鼠模型的骨髓造血恢复具有改善作用。 关键词：再生障碍性贫血； 间充质干细胞 ； 脐带血； 吲哚胺 2，3-过氧化酶； 异基因； 免疫介导 中图分类号 ：R735 DOl：10．3870／j．issn．1672—0741．2013．01．011 EffectofUCB—MSCsIDOExpressiononAllogeneicLymphocyteProliferation andHematopoieticFunctionsin AplasticAnem iaM ice LiYuyun，WeiXiaowei，LiJianetal DepartmentofClinicalLaboratory，BengbuMedicalCollege，Bengbu233030，China Abstract Objective Toexaminetheactivityofindoleamine2，3-dioperoxidase(IDO)inumbilicalcordblood—mesenchy— ma1stem (UCB．MSCs)isolatedfrom humanumbilicalcordbloodandtheimmuneregulatoryroleofUCB-MSCsinthetreat— mentofaplasticanemiamice．Methods Theumbilica1c0dbloodwascollectedfrom full-term deliveries．UCB-MSCswereisola— tedandculturedbyusingthehydroxyethy1starchsedimentation+lymphocyteisolationmethod．ThemorphologyofUCB-MSCs wasobservedbylightmicroscopyandthesurfacemarkersanalyzedbyflow cytometry．Thedifferentiation potentia1ofUCB。 MSCswasevaluatedby inducingosteogenicandadipogenicdifferentiation．TheIDO expression inallogeneiclymphocytecul— tureswasdetected．Immune—mediatedaplasticanemiamodelswereestabl