真核细胞蛋白质的生物合成.ppt

细胞内有2种可携带Met的tRNA，它们都识别同样的AUG密码子，但它们的一级结构和功能不同。 （2）tRNAmMet带上Met后不能甲酰化，用于肽链的内部，在肽链延伸中起作用。 （1）tRNAf Met 带上Met后能甲酰化，是起始tRNA，用于肽链合成的起始。 所以AUG和GUG是兼职密码子，它们既可以作为起始密码子，作为肽链合成的起始信号，这时与之对应的氨基酸是甲酰Met。另外也可作肽链内部相应aa的密码，这时AUG编码Met,GUG编码val。 此反应须起始因子3（IF3） P位：肽基的结合部位 A位：氨酰基的结合部位 起始密码定位在P位上 SD序列 Shine-Dalgarno发现在AUG的前 方有一段富嘌呤AG区，与30S中的16SrRNA富含嘧啶的区结合 八、多肽合成起始的三个步骤 1、30S-mRNA复合物的形成 2．肽链的起始： mRNA中的起始密码是AUG，少数是GUG。 起始密码子的上游约10个核苷酸的地方往往有一段富含嘌呤的序列称SD序列（Shine-Dalgarno序列），一般为3～10个核苷酸，它与核糖体16srRNA 3ˊ端的核苷酸序列互补，可促使核糖体与mRNA的结合。 消耗一个高能键 IF1起协助作用，促进IF3,IF2的作用，然后在IF1参与下，mRNA-30S-IF3进一步与fMet-tRNAf,GTP相结合，并释 放出IF3形成 一个30S起始复合物， 30S核糖体—mRNA-fMet-tRNAf。 2、30S预起始复合物（IF1,IF2,GTP） 肽键的合成 inactive 70S ribosome SD sequence 30S initiation complex 70S initiation complex GDP + Pi 肽链的延长需要一些延长因子或称延伸因子（elongation factor,EF） 原核生物的EF有EF-T和EF-G两类: EF-T：延伸因子“T”，开始误认为这类延伸因子有肽基转 移酶的活性peptidyl transferase，所以取转移酶的第一个字 母“T” 。 3. 肽链的延长： EF-G：这类延伸因子与核糖体结合时需要GTP，当GTP水 解时，这类延伸因子就从核糖体上解离下来，总之涉及 GTP，所以用GTP的第一个字母“G”，EF-G。 EF-T是由Tu和Ts两个亚基组成的二聚体， EF-Ts：s是stable的意思，是稳定蛋白质， EF-Tu: u是unstable，不稳定蛋白质。 EF-Tu直接参加了氨酰-tRNA与核糖体的结合。 氨酰-tRNA进入核糖体的A位 肽键的形成 移位 肽链的延长包括3步: 这是个比较复杂的过程，需Ts、Tu，还要 消 耗GTP。EF-Tu与GTP和氨酰-tNRA首先形成三元 复合物，才能进入A位。 （1）氨酰-tRNA进入核糖体的A位 （2）肽键的形成 通过一个转肽作用（transpeptidation），由肽酰转移酶（peptidyl transferase）催化，使一个酯键变成了肽键，肽基转移酶的活性由核糖体大亚基的23s rRNA承担（肽基转移酶是一种ribozyme）。嘌呤霉素对蛋白质的抑制作用就发生在肽键形成这一步。 （3）移位（translocation） 移位包括三种运动: 空载的tRNA离开P位。 二肽基tRNA由A位移到P位 核糖体沿mRNA的5ˊ→3ˊ方向 移动一个密码子的距离。 移位需要EF-G和GTP。 4．肽链的终止与释放： 释放因子（release factor RF）能识别终止密码子与终止密码子结合。 UAA RF1 or RF2 终止密码子 RF-1：识别UAA和UAG RF-2：识别UAA和UGA RF-3：RF-3和GTP形成复 合物，是一种GTP结合蛋 白，可促进核糖体与RF-1 和RF-2的结合。 30S起始复合物再与50S亚基结合，形成一个有生物学功能的70S起始复合物，同时GTP水解成GDP和Pi,IF1、IF2,被释出。这时fMet-tRNAf占据了核糖体上P位点, 空着的A位点准备接受另一个氨酰-tRNA, 为肽链延伸作好了准备。 3、70S起始复合物 肽键的合成 EFTu先与GTP结合， 再与氨酰-tRNA结合形成一个复合物，再与70S起始复合物相结合，并释放出 EFTu-GDP,EFTu-GDP再与EFTs及GTP反应，重新形成很不稳定EFTu-GDＰ…… 九、延长阶段