14.胃肠安丸抗腹泻因子轮状病毒的作用.pdfVIP

14.胃肠安丸抗腹泻因子轮状病毒的作用.pdf

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胃肠安丸抗腹泻因子轮状病毒的作用 天津市卫生防病中心 韩才中 赵淑敏 内容提要 实验目的:应用电镜技术,ELISA及核酸电泳PAGE,测 试胃肠安对腹泻病毒因子,轮状病毒及其核酸成分的作用。 材料和方法 1.样品名称:轮状病毒:为防病中心实验室保存之样本,均径EUSA 及PAGE测定证实含轮状病毒。 药物:乐仁堂制药厂胃肠安成药原材料 2.实验方法:本次实验前将中药制成80——100%煎剂冷却后与病毒 以不同配比混合,使含中药之浓度最终达到4,20,29及40%,并将 病毒对照于37ºC孵育不同时间,或/及4ºC过夜,病毒核酸与中药之 试验原则同上。 Ⅰ.中药对病毒之影响: 下述实验均为中药与病毒作用后进行。 1.对病毒抗元性的影响(ELISA)(表1) 2. 对病毒核酸的影响(NA PAGE): 以一定浓度药物处理病毒,提取核酸液,作定量对比,(表2) 3. 对病毒形态的影响: 以粗提轮状病毒与25%,50%之中药,在37ºC作用2小时,经PTA 负染电镜观察形态(表3) Ⅱ.中药对病毒核酸的影响: 提取之病毒核酸与一定浓度之中药作用,作PAGE (表4) 结果: 用实验方法测试药物对病原微生物的作用与影响,只能从 形态等,抗元性变化以及对遗传基因的改变加以推测,特别对无 敏感的实验动物模型及不能培养的病原微生物更是如此。对天津 乐仁堂药厂的成药 “胃肠 ”测试其对秋冬季幼儿腹泻的病毒病 原轮状病毒的作用,在实验室内,我们用已知轮状病毒标本,从 形态学、抗元性以及遗传基因三个方面测试胃肠安对此病原的作 用,初步实验结果该药物对轮状病毒之形态无影响,对病毒之抗 元性、应用了11株轮状病毒标本,其中2株产生了抗元性变化, 大部分病毒(8/11)抗元性无改变,对病毒核酸的影响方面,药 物与病毒作用后,测试病毒核酸之变化,4ºC及37ºC 中均有作用, 29%药物浓度,4ºC 中过夜即使病毒基因降解,20%药液浓度37ºC 中1小时即有部分降解,40%药物对病毒作用,37ºC、30分即达 到降解核酸之目的,药物对病毒核酸之作用,40%、37ºC 四小时 或4ºC过夜均可达到降解核酸之目的。 因此我们认为胃肠 ,在一定浓度下,对轮状病毒之基因有 一定影响,对病毒之抗元性亦可能产生一定影响. 表1 对病毒抗元性的影响(ELISA) 40%药物与病毒37ºC作用 4ºC过夜OD值 病毒号 对照OD 1小时 2小时 4小时 8小时 48 0.62 1.1 1.05 0.92 - 51 1.4 1.37 1.25 0.85 - 28 1.2 1.4 1.4 1.45 1.45 29 1.3 1.3 1.08 1.4 1.5 30 1.01 1.5 1.5 1.5 1.5 31 1.4 1.22 1.25 1.25 1.22 33 1.35 1.3 1.25 1.25 1.25 34 1.0 1.02 1.0 1.0 0.92 35 0.75 0.79 0.80 0.85 36 0.41 1.02 1.07 1.0 1.1 37

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