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Survivin在脑星形细胞瘤中表达的意义及其与p16关系的研究
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Survivin在脑星形细胞瘤中表达的意义及其与p16关系的研究
浙江大学医学院 外科学(神经外科)
2001级硕士研究生 刘凡隆
导 师 詹仁雅主任医师
周永庆主任医师
摘 要
研究目的
细胞凋亡的抑制与恶性肿瘤的发生发展以及对化疗、放疗不敏感有密切关系。
Survivin是新近发现的一种凋亡抑制基[](i11|hibitor
ofapoptosis,IAP),以周期调岢的方
式选择性地表达于细胞周期的G2/M期,具有抑制细胞凋亡和调节细胞分裂的功能。
1期重要的负调节
p16基阗又称多肿瘤抑制基因,直接参与细胞周期的调节,是细胞G
蛋白。为了探索脑星形细胞瘤基因变异在发病中的意义,进而寻找有效的治疗方法,
本研究利用sP免疫组化方法检测人脑星形细胞瘤Survivin及p16的表达,并对其表达
与星形细胞瘤的病理学形态、组织学分级和患者年龄、性别之问的关系进行分析,讨
展中的作用,为临床治疗星形细胞瘤提供新的思路。
材料与方法
L标本来源及准备:选用浙江大学医学院附属第一医院1999年8月到2003年10
月神经外科手术切除并经病理检查证实的旱形细胞瘤标本56例,其中男性3l例,女
性25例,年龄4~84岁,平均年龄39.7岁。所有患者术前均未接受过放化疗。星形
细胞瘤标本根据Kemohan分级法进行分级,分为I级9例、II级20例、ⅡI级17例、
Ⅳ级lO例。对照组为正常脑组织7例,标本取自同期颅脑外伤患者内减压术。
5uill),行HE和免
2.免疫组化染色:肿瘤组织经常规石蜡包埋后连续切片(厚4
2
塑生堂堂堕塑土堂生堕兰 Survivln存腑jd形细胞瘤rrl表达的愈义厦其与p16哭系的研究
疫组织化学法染色(SP法)。抗体为兔抗人Survi
vin多抗(1:150)及兔抗人口16多
抗(1:150)。免疫组化染色sP试剂盒,按其操作说明书进行染色。以已知特异性的
阳性病例乳腺癌标本作为Survivin及p16阳性对照,以P/3S缓冲液代替一抗作阴性对
照。
Survivin刖性为细胞浆呈棕黄色或棕褐色,p16阳性为细胞核和细胞浆着棕褐色或
棕黄色,染色结果综合染色强度及阳性细胞数量两个方面进行结果判定。染色强度判
定:阴性(0分),染色弱但明显高于阴性对照(1分),染色清晰(2分),染色强(3
分)。阳性细胞数量判定:选染色均匀的区域,在400倍视野下计数着色细胞占视野细
胞总数的百分数,共计数5个视野,取平均值。每例标本按阳性细胞所占百分比评分
and
50%(2分),阳性细胞数50%(3分)。记分标准参照Remmele
Stegnerde的半定
量记数方法,即根据染色强度、阳性细胞数和两者记分的乘积进行判断,依次为阴性
关系数以“表示。本实验所有数据均用SAS(6.12版)软件包完成统计。
结 果
Survivin的阳性表达强度逐渐增高,有显著差异(x2。。f17.3285,P0.01)。
本组止常脑组织中p16刚性表达率为100%。随着星形细胞瘤病理级别的增高,p16
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