3779-783接792基础研究5-8UV-B辐射下雪地衣藻基因表达差异的研究.pdf

现代食品科技 Modern Food Science and Technology 2010, Vol.26, No.8 UV-B辐射下雪地衣藻基因表达差异的研究 耿予欢，石磊，李国基 （华南理工大学轻工与食品学院，广东广州510640 ） 摘要：采用mRNA差异显示技术研究了UV-B辐射下雪地衣藻的基因表达差异性，发现UV- B辐射处理能使细胞在基因表达上产生了一定的差异。总mRNA 的RT-PCR产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，UV- B辐射的细胞出现了一些新的基因扩增片段。这些片断将为进一步进行差异表达基因片段的扩增和基因表达产物的功能鉴定奠 定一定的基础。 关键词：雪地衣藻；UV-B辐射；mRNA差异显示 文章篇号：1673-9078(2010)8-779-783 Difference of Gene Expression of Chlamydomonas nivalis under UV-B Radiation GENG Yu-huan, SHI Lei, LI Guo-ji (College of Light Industry and Food Sciences, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China) Abstract: The effect of UV-B radiation on gene expression of C. nivalis by mRNA differential display was studied. The results showed that UV-B radiation could cause the gene expression of C. nivalis changed. There were some new gene expression products in the polyacrylamid gel electrophoresis of RT-PCR product of mRNA in C. nivalis which was treated by UV-B. Key words: Chlamydomonas nivalis; UV-B radiation; mRNA differential display 779 mRNA差异显示技术 （mRNA differential 提取两种细胞的mRNA→逆转录合成2种cDN display reverse transcription PCR ，DDRT- A→ 以一定的引物做随机聚合酶链式反应→ 电 [1] PCR ）是由Liang和Pardee于1992年提出的 。 泳差异显示→从凝胶上回收差异条带，再扩 这一技术的依据是在高等真核生物中所有的 增→Northern 生理过程和病理变化，不论是由单基因控制 杂交并验证cDNA探针→克隆cDNA探针→对 还是由多基因控制，最终都是通过基因表达 目的DNA测序→分析该基因的功能。 蛋白质或量的差异来体现出来。因此，mRN 自mRNA差异显示PCR技术问世以来，已 A差异显示技术是一种比较不同细胞系、不同 在个体生长发育调节、细胞增殖分化与凋亡 组织间，或同一细胞系、同一组织不同条件 、肿瘤发生等许多生理和病理过程的分子机 下基因表达差异的方法。mRNA差异显示技 制研究中得到广泛应用。 术以分子生物学上最广泛应用的两种技术， 雪地衣藻C. 即聚合酶链式反应PCR和聚丙烯酰胺凝胶电 nivalis是一种淡