水中汞甲基化过程.pdf

中国污水处理工程网（） 找污水处理技术，上中国污水处理工程网 水中汞甲基化过程 1 引言 20 世纪 80 年代，科学家们发现在北美和北欧一些新建的水库以及一些远离汞污染源的湖泊 中，某些鱼汞含量也远远超过了世界卫生组织建议的食用水产品汞含量标准，这一现象引起了人 们对水环境系统中汞的生物地球化学循环的极大关注，特别是汞的甲基化途径和机制问题.在汞 甲基化的途径中，有生物作用和非生物作用，其中生物作用起主导作用.研究表明，在淡水体系 中硫酸盐还原菌和铁还原菌均是重要的汞甲基化细菌，尤其是硫酸盐还原菌一直被认为是淡水体 系中主要的汞甲基化细菌，因此硫循环在汞形态分布和汞甲基化过程中也起到至关重要的作用. 认为 SO42-在 20~50 mg · L-1 时，最适合 SRB 的甲基化活动.在近期的一些研究中，铁还原菌也 被证实可进行数量可观的甲基化，尤其在富含铁的沉积物中.虽然关于硫酸还原菌和铁还原菌在 汞甲基化中的作用研究很多，但大多数结论都基于实验室研究，对野外两种微生物和甲基汞间的 关系研究较少.阿哈、百花和红枫水库为贵阳市饮用水源地，其受酸性矿山废水(阿哈水库)、含 汞废水 (百花水库)、生活污水(红枫水库)严重污染，造成这些水库某些理化特征差异明显，这些 都将可能显著影响汞的甲基化过程.本研究旨在这些不同理化特征基础上弄清两种还原性微生物 在这些水库中的分布及其对汞甲基化的影响，可为这些水库的治理提供一定科学依据，以保障贵 阳市人民的用水安全. 2 样品采集与分析 2.1 样品采集 采样点分布如图 1 所示.阿哈水库和百花水库采样时间为 2012 年 2 月、6 月、9 月 3 个季节， 红枫水库作为对比参照点仅在 2012 年 6、9 月份进行采样.水库水样从表层到底层每 4 m 取一个 样，需测溶解态物质样品用 0.45 μ m 滤膜 (Millipore)现场过滤.水样用 0.5%盐酸酸化存于经过 超净技术处理过的硼硅玻璃瓶中，然后放在冰箱中冷藏避光保存.微生物测定水样用装有稀释液 的厌氧管或装有培养液的测试瓶采集.沉积物柱采用 SWB-1 型便携式不扰动湖泊沉积物采样器采 集.快速将沉积物样品在氮气条件下按 1 cm 或 2 cm 的间距分割，装入经过酸预处理的 50 mL 聚 乙烯离心管中，盖紧并用 parafilm®密封，放置在冷却箱中低温保存.提取孔隙水的样品，必须在 48 h 内按以下方法处理：首先在4 ℃恒温、转速 3000 r · min-1 的条件下离心 30 min，然后 用 0.45 μ m 滤膜 (Millipore)过滤提取孔隙水.提取孔隙水后的沉积物样品用真空冷冻干燥仪 (FD-3-85D-MP 型冷冻干燥仪，-80 ℃)干燥，并研磨至 150 目以供分析. 中国污水处理工程网（） 找污水处理技术，上中国污水处理工程网 图 1 水库采样点分布图 2.2 样品测定 (1)沉积物及水库水样中 SRB 的测定 充氮条件下称取 10 g 沉积物于装有 100 mL 无菌无氧水 的厌氧三角瓶中，摇床上振荡 20 min 后，用 1 mL 无菌注射器取 1 mL 上清液于 KBC-SRB 试剂瓶 (北京华运安特科技有限责任公司)中进行梯度稀释，每个样品做 6 个梯度，3 个平行.水库水样直 接进行梯度稀释.将注射好的试剂瓶放入 35 ℃培养箱中培养 7 d.根据试剂瓶的阳性反应数(出现 黑色沉淀或者铁钉变黑)查 MPN 计数表确定其 MPN 数，再计算其实际含量(按沉积物湿重计). (2)沉积物及水库水样中 DIRB 的测定 样品中 DIRB 采用滚管培养法测定.将沉积物悬浊液或 水样在装有无菌无氧稀释液(NaCl 0.85 g，Na2HPO4 0.25 g，NaH2PO4 0.56 g，蒸馏水 100 mL) 的厌氧管中进行梯度稀释.用 1 mL 无菌注射器分别吸取不同稀释梯度的稀释液各 0.5 mL 于装有 融化的柠檬酸铁培养基(柠檬酸铁 3.3 g，NH4Cl 1 g，CaCl2 · 2H2O 0.07 g，MgSO4 · 7H2O 0.6 g，K2HPO4 · 3H2O 0.722 g，KH2PO4 0.25 g，葡萄糖 10 g，琼脂粉 10 g)厌氧管中，而后 将其平放于盛有冰块的盘中迅速滚动至培养基在试管内壁均匀凝固，然后将厌氧管置于 3