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肝中酮体的生成
生化实验（四） 肝中酮体的生成 实验目的 了解组织匀浆的制备方法，证明酮体生成是肝脏特有的功能。 实验原理 酮体：FA在肝脏经 ? - 氧化生成的乙 酰CoA在酶的催化下转变成的 三种中间代谢物的总称 乙酰乙酸 acetoacetate ? - 羟丁酸 ? - hytroxybutyrate 丙酮 acetone 以丁酸作为底物，与肝组织匀浆（含酮体合成酶系）保温后即有酮体生成。 酮体与含有亚硝基铁氰化钠的显色粉反应形成紫红色化合物 实验步骤 1．肝匀浆、肌匀浆的制备 取兔一只，气栓致死，迅速剖腹、取出肝和肌肉，组织匀浆器中打成匀浆，若匀浆不充分，再分别放入研钵中，研磨成匀浆，加入生理盐水按重量：体积=1：3稀释。 3．将上列4支试管摇匀后，放置于37℃恒温水浴箱中保温40-50分钟。 4．取出各管，各加入15%三氯醋酸溶液20滴，混匀，离心5分钟（3000转/分）。 5．取白瓷反应板一块，从上述4支试管中各取出5滴离心液分别置于反应板的4个凹槽中，然后向4凹槽中各加入显色粉一小匙（约0.1g），观察并记录每凹所产生的颜色反应，并解释之。 * * 试剂（滴） 1 2 3 4 洛克溶液 15 15 15 15 0.5M丁酸溶液 30 — 30 30 0.1M磷酸盐缓冲液 15 15 15 15 肝匀浆 20 20 — — 肌匀浆 — — — 20 蒸馏水 — 30 20 — *
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