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dna的抽取 - 元智大学
DNA的抽取 元智大學通識中心 康世旭 細胞的內容物 水 蛋白質 核酸(DNA與RNA) 醣類 礦物質與維生素(少量) 如何把DNA萃取出來 水(溶劑) 蛋白質(溶質,遇到phenol之類的有機溶劑,被失去功能,並且會沈澱出來) DNA(溶質,不怕phenol之類的有機溶劑,但在鹼性溶液中,結構會發生改變) 染色體(大分子的DNA,3000~ 106 kb) 質體(小分子的DNA,2~1000 kb) 醣類與礦物質、維生素:一般而言,少量,不影響我們的實驗 DNA結構與變性 質體與染色體 實驗器材與藥品 電泳槽 Micropipette 竹籤 手套 離心機 Quich screening buffer Phenol/chloroform 流程 以竹籤刮取菌(看得到菌塊就好了) 將沾有細菌的竹籤一端放在eppendorf中 流程 加入quick screening buffer(鹼性液體) 將菌塊抖散quick screening buffer中 兩分鐘後,加入phenol/chloroform(可中和鹼性,並將蛋白質變性沈澱) 離心三分鐘 流程 觀察離心後的結果 取10 ul DNA溶液,與2 ul loading dye混合,進行DNA電泳 染色,觀察結果 * * 在鹼性溶液或被加熱時 當DNA分子太大時,無法回復為原形 tip eppendorf tip eppendorf 大 小 *
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