- 1、本文档共6页,可阅读全部内容。
- 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
查看更多
n -糖酰胺酶f( pngase f)在大肠杆菌中的表达纯化及其脱糖基化
4 2 4 ( ) Vol . 4 2 ,No . 4
第 卷第 期 上海师范大学学报 自然科学版
2 0 1 3 8 Journal of Shanghai Normal University (Natural Sciences) Aug . ,2 0 1 3
年 月
N - 糖酰胺酶F (PNGase F)在大肠杆菌中的
表达纯化及其脱糖基化作用鉴定
*
, ,
闵伟勇 刘 丽 张 舟
( , 200234)
上海师范大学生命与环境科学学院 上海
摘 要:N - 糖酰胺酶F (PNGase F)是由革兰氏阴性菌———脑膜炎脓杆菌分泌的一种分子量
34 . 8 kDa . PCR 945 bp N - F ,
为 的去糖基化酶 本研究通过 技术扩增出 的 糖酰胺酶 基因 经酶
、 , pET28a - PNGase F. pET28a - PNGase F
切 连接 构建了大肠杆菌表达载体 将 转入大肠杆菌
BL21 ,16 ℃ Ni ,SDS - PAGE , 95%
中 诱导表达及 柱纯化后 鉴定 获得超过 纯度的可溶性表达
N - F. Na + 1 (SNAT1) 2 (SNAT2)
的 糖酰胺酶 对 依赖的中性氨基酸转运蛋白 和 进行脱糖基化
, : N - F SNAT1 SNAT2 .
作用检测 结果证明 纯化的 糖酰胺酶 对 和 具有高效的脱糖基化作用
:N - F ; ; SNAT ;
关键词 糖酰胺酶 可溶性表达与纯化 中性氨基酸转运蛋白 脱糖基化
+
: : :
中图分类号 Q 513 . 2 文献标识码 A 文章编号 1000-5137 (2013)04-0372-06
0 引 言
N - F (PNGase F) ,
糖酰胺酶 主要是由脑膜炎脓杆菌等革兰氏阴性菌分泌的一种酰胺水解酶 分子
量为34 . 8 kDa , [1 - 2]. N - F N - ,
也存在于一些真核生物细胞内
文档评论(0)