莴苣丛枝植原体胶体金免疫层析试纸条的初步研制 - 云南农业大学.pdf

云南农业大学学报　ＪｏｕｒｎａｌｏｆＹｕｎｎａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，２０１５，３０（５）：６７１－６７５ ｈｔｔｐ：／／ｘｂｙｎａｕｅｄｕｃｎ ＩＳＳＮ１００４－３９０Ｘ；ＣＯＤＥＮＹＮＤＸＡＸ Ｅｍａｉｌ：ｘｂ＠ｙｎａｕｅｄｕｃｎ ：１０１６２１１／ｊｉｓｓｎ１００４－３９０Ｘ（ｎ）２０１５０５００３ ＤＯＩ 莴苣丛枝植原体胶体金 免疫层析试纸条的初步研制 １ １ １ １ ２ １ １ 薛　正 ，姚　琪 ，曾丛芳 ，施美辰 ，文建斌 ，蔡　红 ，陈海如 （１云南农业大学 植物病理重点实验室，云南 昆明６５０２０１； ２云南省建水县农业技术推广所，云南 建水６５４３９９） 摘要：采用柠檬酸三钠还原法制备２５ｎｍ粒径胶体金颗粒，在ｐＨ８５的条件下与２１ ｇ／ｍＬ兔抗莴苣丛枝植原 μ 体 （ＬｅＷＢ）免疫膜蛋白 （Ｉｍｐ）多克隆抗体形成稳定的胶体金蛋白复合物，将兔抗莴苣丛枝植原体免疫膜蛋 白ＩｇＧ与羊抗兔ＩｇＧ分别点在硝酸纤维素膜上作为检测线 （Ｔ）和质控线 （Ｃ），组装成胶体金免疫层析试纸 条。结果表明：该试纸条除可以检测莴苣丛枝植原体外，还能检测与其具有相同免疫膜蛋白特性且隶属 １６ＳｒＩＩＡ亚组的其他植原体株系，如菊苣丛枝植原体 （ＣｈＷＢ）、扁豆花变绿植原体 （ＬｅＶＰ）、蕹菜丛枝植原体 （ＷＳＷＢ）、银胶菊花变绿植原体 （ＰａＶＰ）等。试纸条可特异检测 １６ＳｒＩＩＡ亚组植原体株系，对莴苣丛枝植原 体阳性材料的检测灵敏度为稀释１００倍。 关键词：植原体；胶体金免疫层析；检测试纸条；１６ＳｒＩＩＡ亚组 中图分类号：Ｓ４３６３６　　文献标志码：Ａ　　文章编号：１００４－３９０Ｘ（２０１５）０５－０６７１－０５ ＰｒｅｌｉｍｉｎａｒｙＡｓｓａｙｏｆＧｏｌｄＩｍｍｕｎｏｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃＳｔｒｉｐｆｏｒ ＬｅｔｔｕｃｅＷｉｔｃｈｅｓｂｒｏｏｍＰｈｙｔｏｐｌａｓｍａＤｅｔｅｃｔｉｏｎ １ １ １ １ ＸＵＥＺｈｅｎｇ，ＹＡＯＱｉ，ＺＥＮＧＣｏｎｇｆａｎｇ，ＳＨＩＭｅｉｃｈｅｎ， ２ １ １ ＷＥＮＪｉａｎｂｉｎｇ，ＣＡＩＨｏｎｇ，ＣＨＥＮＨａｉｒｕ （１ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｆｏｒＰｌａｎｔＰａｔｈｏｌｏｇｙｏｆＹｕｎｎａｎＰｒｏｖｉｎｃｅ，ＹｕｎｎａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｋｕｎｍｉｎｇ６５０２０１，Ｃｈｉｎａ； ２ＩｎｓｉｔｉｔｕｔｅｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＥｘｔｅｎｓｉｏｎｏｆＹｕｎｎａｎＰｒｏｖｉｎｃｅ，ＪｉａｎｓｈｕｉＣｏｕｎｔｙ，Ｊｉａｎｓｈｕｉ６５４３９９，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｒｉｓｏｄｉｕｍｃｉｔｒａｔｅｗｉｔｈａｑｕｅｏｕｓｇｏｌｄｃｈｌｏｒｉｄｅｗａｓｗａｒｍｅｄｕｐａｎｄｍｉｘｅｄｔｏｍａｋｅ２５ｎｍｃｏｌ ｌｏｉｄａｌｇｏｌｄｐａｒｔｉｃｌｅｓａｎｄｔｈｅｃｏｌｌｏｉｄａｌｇｏｌｄａｎｔｉｂｏｄｙｃｏｍｐｌｅｘｓｕｂｓｔａｎｃｅｗａｓｆｏｒｍｅｄｕｎｄｅｒｔｈｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｏｆｐＨ８５ａｎｄ２１μｇ／ｍＬｒａｂｂｉｔａｎｔｉｉｍｍｕｎｏｄｏｍｉｎａｎｔｍｅｍｂｒａｎｅｐｒｏｔｅｉｎａｎｔｉｂｏｄｙｏｆＬｅｔｔｕｃｅｗｉｔｃｈｅｓ ｂｒｏｏｍｐｈｙｔｏｐｌａｓｍａ（ＬｅＷＢ）．ＴｈｅｒａｂｂｉｔａｎｔｉＩｍｐｏｆＬｅＷＢＩｇＧａｎｄｇｏａｔａ