小分子靶标的核酸适配体筛选的研究进展 - 色谱.pdf

２０１６年４月 Ｖｏｌ．３４ Ｎｏ．４ Ａｐｒｉｌ ２０１６ ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ３６１～３６９ 多尺度靶标的核酸适配体筛选研究进展专栏 ·专论与综述 ＤＯＩ：１０．３７２４／ ＳＰ．Ｊ．１１２３．２０１５．０５００１ 小分子靶标的核酸适配体筛选的研究进展 １ １，２ ３ １ １∗ 王　 勇 ，　 赵新颖 ，　 石冬冬 ，　 杨　 歌 ，　 屈　 锋 （１． 北京理工大学生命学院，北京 １０００８１；２． 北京市理化分析测试中心，有机材料检测技术 与质量评价北京市重点实验室，北京 １０００８９；３． 中国农业科学院饲料研究所，北京 １０００８１） 摘要：核酸适配体（ａｐｔａｍｅｒ）是通过指数富集配体系统进化（ＳＥＬＥＸ）技术筛选得到的核糖核酸（ＲＮＡ）或单链脱氧 核糖核酸（ｓｓＤＮＡ）。 核酸适配体通过高亲和力特异性地识别小分子、蛋白质、细胞、微生物等多种靶标，在生物、医 药、食品和环境检测等领域的应用日渐增多。 但目前实际可用的核酸适配体有限，其筛选过程复杂，筛选难度大， 制约了其应用。 与生物大分子、细胞和微生物等靶标不同，小分子靶标与核酸分子的结合位点少、亲和力弱，且靶 标通常需要固定在载体上。 此外，小分子靶标结合核酸形成的复合物与核酸自身的大小、质量、电荷性质等方面差 异较小，二者的分离难度大。 故小分子靶标的核酸适配体筛选过程与大分子和细胞等复合靶标相比有明显差异， 筛选难度更大。 因此需要根据其自身结构特点和核酸适配体的应用目的选定靶标或核酸库的固定方法，优化靶标 核酸复合物的分离方法。 本文介绍了不同类型小分子（具有基团差异的单分子、含相同基团分子和手性分子等）靶 标的选择及其核酸适配体的筛选方法，并对核酸库的设计、与靶标结合的核酸的分离方法和亲和作用表征方法进 行了介绍，列出了自２００８年以来报道的４０余种小分子靶标的核酸适配体序列和复合物的平衡解离常数（Ｋ ）。 ｄ 关键词：核酸适配体；小分子靶标；筛选；综述 中图分类号：Ｏ６５８　 　 　 文献标识码：Ａ　 　 　 文章编号：１０００⁃８７１３（２０１６）０４⁃０３６１⁃０９ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｄｖａｎｃｅｓ ｏｆ ａｐｔａｍｅｒｓ ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ ｆｏｒ ｓｍａｌｌ ｍｏｌｅｃｕｌｅ ｔａｒｇｅｔｓ １ １，２ ３ １ １∗ ＷＡＮＧＹｏｎｇ ，ＺＨＡＯ Ｘｉｎｙｉｎｇ ，ＳＨＩ Ｄｏｎｇｄｏｎｇ ，ＹＡＮＧ Ｇｅ ，ＱＵ Ｆｅｎｇ （１．Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ ＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅ，Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ １０００８１，Ｃｈｉｎａ； ２．Ｂｅｉｊｉｎｇ ＣｅｎｔｒｅｆｏｒＰｈｙｓｉｃａｌ ａｎｄ ＣｈｅｍｉｃａｌＡｎａｌｙｓｉｓ，Ｂｅｉｊｉｎｇ ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ ＯｒｇａｎｉｃＭａｔｅｒｉａｌｓ Ｔｅｓｔｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ＆ＱｕａｌｉｔｙＥｖａｌｕａｔｉｏｎ，Ｂｅｉｊｉｎｇ １０００８９，Ｃｈｉｎａ；