合浦珠母贝基质蛋白krmp-3 对二价金属离子选择性的研究 - 海洋科学.pdf

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2017-09-02 发布于天津
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合浦珠母贝基质蛋白krmp-3 对二价金属离子选择性的研究 - 海洋科学.pdf

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合浦珠母贝基质蛋白krmp-3 对二价金属离子选择性的研究 - 海洋科学

合浦珠母贝基质蛋白KRMP-3 对二价金属离子选择性的研究 , , , , , ( , 100084) 摘要: 用大肠杆菌表达含有GST 标签的基质蛋白KRMP-3 。利用圆二色谱(Circular Dichroism, CD) 研究不同浓度钙离子和镁离子对基质蛋白KRMP-3 二级结构的影响。结果表明, 钙离子对其二级结构的变化远大于镁离子; 同时, 采用荧光淬灭法研究 KRMP-3 对钙, 镁, 锶, 钡等二价金属离子的选择性, 结果表明, KRMP-3 对钙离子有特异性选择性, 钙离子与KRMP-3 的结合常数K 约为103 L/mol, 结合位点数 n 近似为 1, 表明 KRMP-3 与钙离子的结合能力适中, 推测基质蛋白 KRMP-3 对合浦珠母贝 ( Pinctada fucata)棱柱层形成起到促进作用。关键词: 生物矿化; 基质蛋白KRMP-3; 圆二色谱CD; 荧光淬灭法; 离子选择性中图分类号: Q518 文献标识码: A 文章编号: 1000-3096(2013)04-0026-06 ( Pinctada fucata) [4] [1], ( [5], 95%), , , K n, , 5%, 1 材料与方法 , 1.1 基质蛋白KRMP-3 的表达与纯化 (soluble matrix protein) BL21 GST (insoluble matrix protein), [6] KRMP-3 KRMP-3 2006 ( 4.5), , ( 4.57) pGEX-4T-1(Novagen), ( 7)[2] (100 mg/L)LB , IPTG 1mmol/L, (Nacrein, Prismalin-14, MSI7 ), 16˚C, 30 h GST Gene Fusion System Handbook(Amersham KRMP-3 Bioscience) , GSTrapTM FF [3], , KRMP-3 (GE Healthcare), buffer , 50 mmol/L Tris-HCl, 200 mmo