探究胰蛋白酶对动物细胞培养过程的影响 - 东莞生物教研网.doc

东莞市2014年生物教研会中学生生物学探究性科技论文 编号 探究不同浓度的胰蛋白酶对猪肉组织分散的效果 作者姓名: 叶耀聪 麦焕君 作者单位: 东莞市第六高级中学 辅导老师: 李路娥 联系电话: 探究不同浓度的胰蛋白酶对猪肉组织的分散效果 摘要：应用不同浓度的验验结果表明使用能其中用浓度的溶液处理的。药品（NaCl8.0g，KCl0.2g，Na2HPO4?H2O1.56g，KH2PO40. 2g）倒入盛有双蒸水的烧杯中，玻璃棒搅动，充分溶解，然后把溶液倒入容量瓶中准确定容至1000ml，摇匀即配制成PBS溶液用HCl或NaOH调P到7.4。PBS是磷酸缓冲液的简称，一般的有活性的生物制剂都要用它来稀释，原因就是它具有盐平衡、可调整的适宜pH缓冲作用第三步：用电子称分别称取10g的猪肉放进编号为1到8的烧杯中，用玻璃棒搅拌，分散猪肉并摇匀。 第四步：将各组烧杯放入恒温箱，调到37℃培养10小时。 第五步：十小时后，将各个烧杯的液体用纱布进行过滤，并将过滤后的液体制成临时装片，用龙胆紫染色，制成临时装片，显微镜下观察。 第六步：观察并记录猪肉细胞分散情况，得出实验结果。 2.实验结果与分析 2.1 实验结果的判断方法：以显微镜下，看到的小块紫色的组织作为判断胰蛋白酶分散猪肉组织的效果。 2.2 实验结果： 2.2.1 生理盐水中的猪肉组织分散情况： 用生理盐水处理（10x10）： 用生理盐水处理（10x40） 2.2.2 用0.15%胰蛋白酶溶液处理的猪肉组织分散情况  用0.15%胰蛋白酶溶液处理（10x10）： 用0.15%胰蛋白酶溶液处理（10x40） 2.2.3 用0.25mol/L胰蛋白酶溶液处理的猪肉组织分散情况： 用0.25mol/L胰蛋白酶溶液处理（10x10） 用0.25mol/L胰蛋白酶溶液处理（10x40） 2.2.4 用0.35mol/L胰蛋白酶溶液处理的猪肉组织分散情况： 用0.35mol/L胰蛋白酶溶液处理（10x10） 用0.35mol/L胰蛋白酶溶液处理（10x40） 2.3实验结果分析 由上图可知，在相同环境下，用不同浓度的胰蛋白酶处理的猪肉，分散程度不一样。其中用0.15%胰蛋白酶处理的猪肉分散效果较其它的两种浓度好，说明胰蛋白酶浓度为0.15%对猪肉组织的分散效果最好，0.25%次之，0.35%最差 。而在生理盐水中处理的猪肉组织，在镜检过程中发现很少的紫色组织。 3.讨论与分析结果 3.1对实验结果的讨论 对不同的组织或细胞，胰蛋白酶的使用有一定范围，并不是浓度越高越好，在本实验中，0.25%的胰蛋白酶和0.35%的胰蛋白酶的分散效果明显不如0.15%的分散效果好。本次实验所选的浓度范围是以文献中报道的作为参考，设置了3个浓度，是0.15%的胰蛋白酶对猪肉组织的分散效果比较好，那么在浓度为0.1%—0.2%之间的胰蛋白酶溶液中，会不会还存在一个比0.15%的胰蛋白酶对猪肉组织的分散效果更好的浓度呢？还需要进一步的实验，才能得出结论。 3.2 对实验结果判断方法的讨论 本次实验，对实验结果的判断方法，是个棘手的问题，胰蛋白酶对猪肉在组织的分散效果究竟采用什么样的方法比较科学呢？我们在实验前、实验的过程中以及实验后，都在思考究竟用什么方法来衡量实验结果。在中学实验室，缺乏一些先进的仪器，很难精确的来判断本次实验的结果。在实验中笔者所采取的对实验结果的判断方法，其科学性还有待进一步考证。 4.体会与收获 通过这次实验与探究，不仅让我们提高了动手能力和团队合作能力，而且让我们充分认识到动手实践的重要性。不迷信于文献资料，遇到疑惑的地方便亲自动手实践一次，就可能会有意想不到的收获。实验前，我们也曾相信0.25%的胰蛋白酶效果较其他浓度会更好，但结果显示0.15%的胰蛋白酶效果更好时，我们也并非十分惊讶。因为我们深知，实验一次比想象百次强。科学是严谨的、客观的，因而我们也要用严谨的、客观的态度去对待它。只有这样，才能发现更多，收获更多。 参考文献： [1]百度百科——胰蛋白酶 [2]百度百科——pbs缓冲液