Decoy核酸在LNCaP细胞中作用机制研究.pdfVIP

Decoy核酸在LNCaP细胞中作用机制研究 中文摘要 Decoy核酸在LNCaP细胞中作用机制研究 中文摘要 目的 前列腺癌在接受内分泌治疗2年左右，约50％的患者出现激素抵抗，进 展为去势治疗失败前列腺癌(CRPC)。即使在CRPC状态下，雄激素受体(AR) 作为转录因子仍然持续激活下游基因的转录，产生PSA。通过雄激素受体反 应元件陷阱核酸(ARE DNA)在LNCaP细胞中作用，阻断AR激活， decoy 研究其对下游信号通路的影响。 方法 根据根据目前已知的位于PSA基因启动子．170附近的ARE．I序列 代修饰，同时双侧末端标记生物素或FITC。对照组核酸两端分别标记生物素 核酸与LNCaP细胞核蛋白提取物特异性结合能力，模拟其与雄激素受体(A鼬 特异性结合情况。根据实验结果选取与核蛋白特异性结合最强的decoy核酸， 细胞增殖能力；使用共聚焦显微镜观察转染前后细胞的形态学改变；通过提 取转染后细胞内DNA，行水平电泳检查有无凋亡改变；通过western．bl