one step western kit hrp (rabbit) - 康为世纪.pdf

微信订购：扫一扫右侧二维码 网站订购： 服务热线：4006-222-360 版本号：12/2015 One Step Western Kit HRP (Rabbit) 一步法快速WB（HRP）试剂盒（兔） 目录号：CW2029S （10 preps） CW2029M （50 preps ） 保存条件：2-8℃保存，避免冷冻 产品内容 CW2029S CW2029M Component 10 preps 50 preps Blocking Buffer 100 ml 500 ml Antibody Pretreat Solution （HRP/Rabbit ） 1 ml 5×1 ml Dilution Buffer 100 ml 500 ml Wash Buffer （10× ） 100 ml 500 ml 产品简介 　　一步法快速WB试剂盒（兔）是康为世纪最新研发的Western Blot检测试剂盒，能够 在1小时左右得到高质量的Western Blot结果，且操作简便、检测灵敏度高、背景低、不 需再加入二抗、系统稳定性强。常规的Western Blot 间接法检测过程（封闭、一抗结合 和二抗结合）需要较长的时间，实验流程复杂且需要多步条件优化。胶上的蛋白转移到 载体膜上后，使用试剂盒中的封闭液孵育5 min，再用抗体反应液处理后的一抗孵育载体 膜，经洗涤三次（每次5 min ）后，即可进行发光或显色检测。本试剂盒针对目的蛋白一 抗为兔来源的实验系统使用。 注意事项 1. 客户需自己准备兔来源的一抗。 2. 使用Blocking Buffer封闭液、Antibody Pretreat Solution （HRP/Rabbit）抗体反应 液（兔）、Wash Buffer （10×）漂洗液之前请充分混匀。 3. 漂洗液如在2-8 ℃保存时出现沉淀，请恢复到室温，把沉淀溶解后正常使用，1×漂 洗液可在室温保存一个月。 4. 建议转膜完成后用丽春红等试剂染色，并把膜上多余部分剪去以增加试剂的使用效 率。 5. 一抗和抗体反应液HRP （兔）需要通过预实验来确定最佳的稀释用量。 6. 抗体反应液HRP （兔）、抗体稀释液和抗体用量可根据膜的大小按比例放大或减少。 7. 加入一抗的抗体稀释液可以回收重复使用一次。特异性及亲和力低的抗体不建议重 复使用。回收后抗体如在1-2天内使用放置在2-8 ℃，长期保存请在-20℃冻存，避 免多次反复冻融。 8. 如果存在较高背景的情况，请调整抗体的用量，并增加洗膜次数。 9. 试剂盒内所有试剂请于2-8℃保存，避免冻融。 1 操作步骤 本产品适用于转膜完成后的封闭及抗体孵育步骤，以5 cm×8 cm 膜为例： 1．漂洗液准备：取10 ml Wash Buffer （10×）用蒸馏水稀释至100 ml，即为1×Wash Buffer，待用。每次洗膜用8-10 ml 。 2 ．封闭：转膜完成后，将膜浸没到10 ml Blocking Buffer中，室温封闭5分钟。 3．漂洗：倒掉封闭液，加入8-10 ml 1×Wash Buffer，于摇床上用较大速度漂洗1分钟。 4 ．洗膜的同时可准备抗体孵育液：取Antibody Pretreat Solution （HRP/Rabbit）100 μl 到离心管中，加入兔源一抗3-10 μg，枪头吸打至充分混匀，室温孵育5分钟。加入 至10 ml Dilution Buffer中，充分混匀。 注意：1